中华人民共和国国家标准水果、蔬菜汁游离氨基酸含量的测定GB12292-90Juiceoffruitsandvegetables一Determinationoffreeaminoacid1主题内容与适用范围本标准规定了水果、蔬菜汁中游离氨基酸的提取净化及测定方法。2测定原理水果、蔬菜汁通过阳离子交换树脂,固定及净化氨基酸。用2mol/L氢氧化铁把氨基酸洗脱后,脱氨浓缩。用氨基酸分析仪测定含量。3仪器设备3.1氨基酸分析仪或高压液相色谱仪。3.2玻璃柱,高20cm,内径gems3.3捣碎机,3.4离心机;3.5天平;3.6旋转蒸发器。3.7真空卜燥器。4试剂全部试剂均为分析纯,配制试剂均用去离子水。阳离子交换树脂,Dowex50Wx4型,100一200目,或其他适宜的树脂。盐酸溶液6mol/L,0.1mol/Lo氢氧化钱溶液2mol/Lo氢氧化钠溶液3.5mol/L。4.7每种氨基酸标准溶液0.0025iMo仪器分析用的各种缓冲液。仪器分析用的荀三洲pi试剂。试样选取和制备‘..月‘,曰月,﹃口山.4.:4.东4.5.1液体产品需充分混匀。5.2固体产品选取有代表性的水果和蔬菜洗净,擦于,剥去或削去果皮,用四分法取样1509左右。5.3称样称取样品100-1509,准确至0.019,置于捣碎器的玻璃缸内,加人等量的水。5.4样品捣碎将A样品的玻璃缸装在捣碎机上,在1档速度捣碎1min,取出倒人烧杯中。5.5过滤及离心把已捣碎的样液过滤,吸取lomL滤液放人离心管中,在4000r/min的转速下离已g5mino国家技术监督局1990一03一29批准1990一12一01实施GB12292-905.6脱果胶对含果胶丰富的样液需用乙醉处f9',准确吸取样液5mL,加人34mL96%乙醇,过滤,用15mL80%乙醉分三次冲洗滤纸,将滤液在35℃下减压蒸馏。6分析步骤6.1固定柱的装置将Dowex50WX4树脂装人玻璃圆柱咋:,离上端空出约10cm,用6mol/L盐酸250mL活化树脂,然后用水洗至无氯离子为止(用硝酸银检查,不产生白色沉淀)。调节活塞,使溶液流速为1mL/min.6.2Wl定及洗脱吸取5mL样液或液体产品,除果胶物的样液则取全部,置玻璃圆柱【}】,再加5mL水,待液体通过树脂后再加2mol/L氢氧化铁50mL,可分3一‘次加完,用50-L水洗涤,将加2mol/L氢氧化铁流出的溶液收集在圆底烧瓶内,在减压真空和加热(40一450C)条件下蒸发至卜,用5mL0.1mol/L盐酸溶解。6.3脱氨吸取待测液1mL,加人3.5mol/L氢氧化钠溶液2一3滴,调至pH10.11,放在真空F-燥器中减压蒸F..用ImL水洗涤,再抽真空蒸Ve这样重复2次,加人pH2.2缓冲液0.5-L和。.1moI/L盐酸0.5mL,使pH达到2.2.丙稀释5一10倍后测定。6.4测定用氨基酸分析仪测定氨基酸含量,测定前需做2一3个...