中华人民共和国国家标准GB/T15356一94剂贝通试定观学酸普化。核ChemicalreagentGeneralrulesforthedeterminationofnucleotides1主题内容与适用范围本标准规定了化学试剂核昔酸含量、熔点、比旋光度、层析试验和干燥失重测定的通用方法。本标准适用于化学试剂核昔酸及其衍生物的分析。本标准不适用于药用核昔酸及其衍生物的分析。2弓}用标准GB/T601化学试剂滴定分析(容量分析)用标准溶液的制备GB/T602化学试剂杂质测定用标准溶液的制备GB/T603化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备GB/"I'613化学试剂比旋光度测定通用方法GB/T617化学试剂熔点范围测定通用方法GB/T6”化学试剂采样及验收规则GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T9008液相色谱法术语柱液相色谱法和平面色谱法GB/T9721化学试剂分子吸收分光光度法通则(紫外和可见部分)3一般规定3.1本标准中所用的水、在没有注明其他要求时,应符合GB/T6682中三级水的规格。3.2本标准中所用试剂的纯度应为分析纯。3.3本标准中凡层析测定时,核普酸R,值均应以在完全相同条件下的对照样品的R,值为判断标准,且每次测定都不得省去作为判断标准的对照样品。3.4本标准中凡层析测定需作杂质限量检测时,应使用符合6.1.2.1条之规定的对照样品。熔点测定按GB/T617规定测定。核昔酸的熔点数值可参考附录A(参考件)。比旋光度的测定按GB/T613之规定测定。核昔酸的比旋光度数值可参考附录A(参考件)。国家技术监督局1994一12一22批准1995一10一01实施GB/T15356一946层析试验层析试验用于检测核昔酸的纯度及定性鉴别。所有核昔酸均应以下列方法中选择一种方法进行测定。6.,纸层析6.1.1方法原理纸层析法是以a纸为惰性支持物的一种层析法。分离原理属分配层析的范畴,它利用不同溶质在静止的水相,亦即纸上所吸附的水为固定相和沿纸流动的有机相(即流动相)两相溶剂的不断分配而达分离的目的。核昔酸经层析后,常用比移值(凡)来表示各组分在层析谱中的位置。(凡)值按式(1)计算:·····,.⋯⋯.”.”.“,”。。”..⋯(1)式中:R,—比移值;d.-溶质迁移距离,cm;dm—流动相迁移距离,cm.在一定的条件下,同一核普酸的R。值是一定的。但由于影响R,值的因素较多,一般都采用与对照样品对比,即根据样品与对照样品在层析谱中R,值来进行鉴别,并可在254nm的紫外灯下观察,以显示出杂质斑点的多少和色量来确定样品的纯度。也可剪下斑点,溶于特定溶剂,用紫外分光光度计测定吸光度,并计算样品的含量和杂质的含量。6...