ICS65.020.0↑CCSB04中华人民共和国国家标准农业农村部公告第628二-6_2022转基因植物环境安全检测外源杀虫蛋白对非靶标生物影晌第{O部分:大型蚤Thedetectio]l]lofenvironmentaⅡsafCtyofgeneticaⅡlyInodifiedplants—Ef』℃ctsofexogenousinsecticidalproteinonnon-targetorganⅡsms_PartⅡ0:D″肋2jα『冗〔Ig′2α2023ˉ03—0|实施2022ˉ|2_|9发布Ⅱ蹲中华人民共禾|J国农业农村部±Ⅶ农业农村部公告第628号-6-2022—一口≡月‖部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定本文件按照GB/T1.1_2020《标准化工作导则第]部分:标准化文件的结构利起起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利°本文件的发(|j机构不承担识别专利的责任°本文件由中华人民共和国农业农村部提出°本文件由全国农业转基冈生物安全管理标准化技术委员会归口°本文件起草单位;农业农村部科技发展中心、生态环境部南京环境科学研究所°本文件主耍起草人:刘标、张旭冬、张莉、梁晋刚、刘来盘、沈文静、方志翔°|■农业农村部公告第628号_6-2022转墓因植物环境安全检测外源杀虫蛋白对非靶标生物影晌第]0部分:大型蚤|范围本文件规定了转驰冈植物外源基因表达的杀虫蛋白对大测蚤(Dα帅″jα′′!αg′!α)影||问的检测方法。2引用文适用于件本白质等同〗333333.6半数致死浓度medianlethalconcentration’LC50暴露于受试化合物后’通过统计分析获得的预期能够弓|起受试生物死亡率为50%的受试杀虫蛋白浓度(基于第21d大型蚤死亡率进行计算)。3.7最大耐受试验浓度maximumtoleranceconcentration’MTC与阴性对照相比’受试杀虫蛋白不引起受试对象死亡率显著提高的最大浓度°4原理按—定剂量(浓度)把转基闪植物外源杀虫蛋白均匀混人大型蚤培养液中饲养大型蚤°以混人受试蛋l农业农村部公告第628号-6—2022白溶剂的大型蚤培养液作为阴性对照’以混人已知对大型蚤有毒的有机或无机化合物的培养液为阳性对照°试验21d后观察计算大型蚤的死亡率和存活母蚤的平均新生幼蚤个数等生命参数’比较分析不|司处理间大型蚤生命参数的差异,明确外源杀虫蛋白对大型蚤的潜在暴露意性°5试剂和材料5.|溶剂用于溶解受试杀虫蛋白的蒸馏水、磷酸盐缓冲液(PBS)或其他溶剂°如需要助溶剂’则助溶剂在大型蚤培养液中最大浓度不超过0.5mg/L’且需要确保含助溶剂的溶液对大型蚤的生长和繁殖没有显著不利影响°5.2受试外源杀虫蛋臼受试外源杀虫蛋白可直接从转基因植物中提取纯化...