犐犆犛６５．０２０．３０犅４４中华人民共和国国家标准犌犅／犜３８７４０—２０２０实验动物猴马尔堡病毒检测方法犔犪犫狅狉犪狋狅狉狔犪狀犻犿犪犾—犕犲狋犺狅犱犳狅狉犲狓犪犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狊犻犿犻犪狀犕犪狉犫狌狉犵狏犻狉狌狊（犕犃犚犞）２０２００４２８发布２０２００８０１实施国家市场监督管理总局国家标准化管理委员会发布前言本标准按照ＧＢ／Ｔ１．１—２００９给出的规则起草。本标准由全国实验动物标准化技术委员会（ＳＡＣ／ＴＣ２８１）提出并归口。本标准起草单位：海南出入境检验检疫局检验检疫技术中心、中华人民共和国福州海关、中华人民共和国成都海关、中华人民共和国海口海关、中华人民共和国济南海关、北京脑科学与类脑研究中心、中华人民共和国海口海关、中华人民共和国昆明海关。本标准主要起草人：李丹丹、张体银、安微、王绥家、凌宗帅、李文龙、陈平亚、艾军。Ⅰ犌犅／犜３８７４０—２０２０实验动物猴马尔堡病毒检测方法１范围本标准规定了猴马尔堡病毒实时荧光ＲＴＰＣＲ检测的操作方法。本标准适用于猴马尔堡病毒的检测。２规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。ＧＢ／Ｔ６６８２分析实验室用水规格和试验方法ＧＢ／Ｔ１８０８８出入境动物检疫采样ＧＢ１９４８９实验室生物安全通用要求３术语和定义下列术语和定义适用于本文件。３．１马尔堡病毒犕犪狉犫狌狉犵狏犻狉狌狊一种高致病性病毒，属丝状病毒科（Ｆｉｌｏｖｉｒｉｄａｅ），单股负链ＲＮＡ病毒，基因组约１９．１ｋｂ，为已知的最大的负链ＲＮＡ病毒。３．２逆转录实时荧光聚合酶链式反应狉犲犪犾狋犻犿犲狇狌犪狀狋犻狋犪狋犻狏犲狉犲狏犲狉狊犲狋狉犪狀狊犮狉犻狆狋犻狅狀狆狅犾狔犿犲狉犪狊犲犮犺犪犻狀狉犲犪犮狋犻狅狀；狉犲犪犾狋犻犿犲犚犜犘犆犚将ｍＲＮＡ逆转录为ｃＤＮＡ后再作为模板进行实时荧光ＰＣＲ扩增。ＰＣＲ反应体系中加入一对引物的同时加入一条特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸片段，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；ＰＣＲ特异性扩增时，犜犪狇酶的５′３′外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，实现了荧光信号的...
