免疫学杂志2023年3月第39卷第3期IMMUNOLOGICALJOURNALVol.39No.3Mar.2023·论著·[文章编号]1000-8861(2023)03-0192-08;[DOI]10.13431/j.cnki.immunol.j.20230025缺氧调节肺腺癌小鼠MDSCs来源外泌体携带的miRNA及其免疫抑制功能郑玉涛,邵烁鋆,薛林怡,彭辉勇,朱栋炜*[摘要]目的观察正常(21%O2)和缺氧(1%O2)条件下,髓源性抑制细胞(myeloid-derivedsuppressorcells,MDSCs)来源外泌体(exosomesderivedfromMDSCs,MDSCs-EX)的免疫抑制功能,探究缺氧对MDSCs-EX携带miRNA成分以及免疫抑制能力的影响。方法构建肺腺癌小鼠移植瘤模型,磁珠分选脾脏中的MDSCs,分别在21%O2和1%O2条件下培养MDSCs,提取上清中的外泌体。通过透射电子显微镜观察形态、流式检测颗粒直径、Westernbolt检测特异性蛋白鉴定制备的外泌体。观察正常和缺氧条件下MDSCs-EX对CD3+T细胞增殖的影响。对正常和缺氧条件下MDSCs-EX进行miRNA测序分析,观察2者在miRNA表达上的差异,将差异表达前十位的miRNA作为待筛选miRNA。运用siRNA特异性敲减待筛选miRNA,观察缺氧条件下MDSCs-EX携带的miRNA对其免疫抑制功能的影响。结果成功分选出肺腺癌小鼠脾脏中的MDSCs,并制备了正常和缺氧条件下的MDSCs-EX。相比正常条件下制备的MDSCs-EX,缺氧条件下MDSCs-EX对于CD3+T细胞增殖的抑制能力更强。敲减缺氧条件下MDSCs-EX中表达明显上调的miR-43-3p和Let-7c-5p,MDSCs-EX抑制CD3+T细胞增殖的能力减弱。结论相比正常氧含量环境,缺氧条件下制备的MDSCs-EX具有更强的免疫抑制能力,这与缺氧MDSCs-EX中携带更多的miR-43-3p和Let-7c-5p相关。[关键词]缺氧;髓源性抑制细胞;外泌体;miRNA[中图分类号]R392.9[文献标识码]AHypoxiaregulatesmiRNAandimmunosuppressivefunctionofMDSCS-derivedexosomesZHENGYutao1,SHAOShuojun2,XUELinyi2,PENGHuiyong3,ZHUDongwei2,*1.DepartmentofClinicLaboratory.DantuDistrictPeople'sHospital,Zhenjiang212100,China;2.JiangsuKeyLaboratoryofLaboratoryMedicine,SchoolofMedicine,JiangsuUniversity,Zhenjiang212001,China;3.DepartmentofLaboratoryMedicine,AffiliatedPeople’sHospital,JiangsuUniversity,Zhenjiang212002,China*CorrespondingAuthor:ZHUDongwei,E-mail:1000005601@ujs.edu.cn[Abstract]ThisstudywasperformedtoinvestigatetheeffectsofhypoxiaonmiRNAcomponentsandimmunosuppressiveabilityofmyeloid-derivedsuppressorcells(MDSCs...