·基础研究·抗菌肽⁃Ｍｔ６的理化特性和抗菌活性及联合抗真菌药物对白色念珠菌的作用∗∗黄敏慧１，２∗∗，曾晔１，２，张迎春１，李彩多１，２，吴建伟１，陈峥宏１，２，王涛１，２∗∗∗（１．贵州医科大学基础医学院，贵州贵阳５５００２５；２．贵州省普通高等学校病原生物学特色重点实验室，贵州贵阳５５００２５）［摘要］目的探讨抗菌肽⁃Ｍｔ６（ＡＭＰｓ⁃Ｍｔ６）的理化特性、抗菌活性及联合抗真菌药物对白色念珠菌（Ｃ．ａｌ⁃ｂｉｃａｎｓ）的作用。方法以家蝇抗真菌肽⁃１Ａ（ＭＡＦ⁃１Ａ）为模板，采用氨基酸残基替换法设计ＡＭＰｓ⁃Ｍｔ６，并以生物信息学方法分析其理化特性；挑取对数生长期Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ、金黄色葡萄球菌（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）、枯草杆菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）、大肠埃希菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）、铜绿假单胞菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、甲型副伤寒沙门菌（Ｓ．ｐａｒａｔｙｐｈｉ）及肺炎克雷伯菌（Ｋ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）菌落制备细胞悬液，取菌液１００μＬ和相同体积不同终浓度（１５６.２５～２５００.００ｍｇ／Ｌ）的ＡＭＰｓ⁃Ｍｔ６稀释液混匀，采用微量肉汤稀释法检测ＡＭＰｓ⁃Ｍｔ６对上述各菌属的最小抑菌浓度（ＭＩＣ）、最小杀真菌浓度（ＭＦＣ）及最小杀细菌浓度（ＭＢＣ）；取（０.５～２.５）×１０６ｃｆｕ／Ｌ的Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ菌液１００μＬ和相同体积不同终浓度（０.２５～６４.００ｍｇ／Ｌ）的氟康唑（ＦＬＣ）、两性霉素Ｂ（ＡｍＢ）、伊曲康唑（ＩＴＣ）及５⁃氟胞嘧啶（５⁃ＦＣ）药物稀释液混匀，采用微量肉汤稀释法检测上述各药物对Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ的ＭＩＣ和ＭＦＣ；采用棋盘格法检测ＡＭＰｓ⁃Ｍｔ６分别与ＦＬＣ、ＡｍＢ、ＩＴＣ、５⁃ＦＣ联合使用时对Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ的体外抑制活性，并以部分抑菌浓度指数（ＦＩＣｉｎｄｅｘ）判定联合效应。结果ＡＭＰｓ⁃Ｍｔ６为带有９个正电荷数、疏水性为０.４５１、α⁃螺旋占比８１％的两亲性多肽；ＡＭＰｓ⁃Ｍｔ６对Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ的ＭＩＣ为３１２.５０ｍｇ／Ｌ，对所检测细菌均有抗菌作用，对Ｓ．ａｕｒｅｕｓ、Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ及Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ的ＭＩＣ为６２５.００ｍｇ／Ｌ，对Ｅ．ｃｏｌｉ、Ｓ．ｐａｒａｔｙｐｈｉ、Ｋ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ的ＭＩＣ为１２５０.００ｍｇ／Ｌ；ＡＭＰｓ⁃Ｍｔ６与ＡｍＢ、ＩＴＣ及５⁃ＦＣ联合时，ＦＩＣｉｎｄｅｘ值分别为０.１９、...
