微生物基本(jīběn)检验技术华中科技大学同济(tónɡjì)医院检验科第一页,共二十三页。直接涂片镜检↑涂片镜检标本→分离培养→可疑菌落→生化反应↑血清学鉴定分子生物学技术(jìshù)药敏试验动物试验第二页,共二十三页。1、不染色标本(biāoběn)检查2、染色标本检查第三页,共二十三页。普通光学显微镜普通光学显微镜暗视野显微镜暗视野显微镜相差相差(xiānɡchà)(xiānɡchà)显微镜显微镜荧光显微镜荧光显微镜电子显微镜电子显微镜第四页,共二十三页。普通普通光学显微镜光学显微镜最为常用的一种显微镜,普通显微镜用油镜可放大1000倍,可将0.25μm的微粒放大到肉眼可见(kějiàn)的0.25mm,一般细菌大于0.25μm,故用普通光学显微镜可见(kějiàn)。第五页,共二十三页。暗视野显微镜暗视野显微镜多用于检查不染色的活细菌(xìjūn)和螺旋体的形态及运动观察。第六页,共二十三页。主要用于检查不染色活细菌(xìjūn)的形态及内部结构。第七页,共二十三页。第八页,共二十三页。电子显微镜电子显微镜放大(fàngdà)倍数可达数万至数十万倍,能分辨1nm的物体,可观察细菌表面和内部超微结构。第九页,共二十三页。应用:主要用于检查生活状态下细菌的动力及运动(yùndòng)状况常用方法:压滴法、悬滴法、暗视野显微镜检查第十页,共二十三页。载玻片细菌悬液盖玻片第十一页,共二十三页。动力(dònglì)+:可看到细菌自一处移至另一处,有明显的方向性位移动力-:受水分子撞击细菌呈现布朗运动,只在原地颤动而无位置的改变。第十二页,共二十三页。碱性染料电离后显色离子带正电荷,易与带负电荷的被染物结合。细菌(xìjūn)的等电点在pI2~5之间,易与带正电荷的染料结合而着色。常用的染料有碱性复红、结晶紫、亚甲蓝等。酸性染料:电离后显色离子带正电荷,易与带负电荷的被染物结合。通常用来染细胞质,而很少用于细菌的染色。常用的染料有伊红、刚果红等。复合染料(中性染料)及荧光染料复合染料是碱性染料和酸性染料的复合物,如瑞氏染料(伊红亚甲蓝)、姬姆萨染料(伊红天青)等;荧光染料如荧光标记的抗体,荧光素常用异硫氢基荧光素。用于某些特殊的染色技术。脂溶性染料如Sudanblack。第十三页,共二十三页。染色方法(fāngfǎ)的种类单染法:采用一种染料染色复染法(鉴别染色):采用两种或两种以上的不同染料进行先后染色,使不同种类的细菌、同种细菌的不同结构,分别染上不...