基因工程药物——促红细胞生成素〔EPO〕第一页，共十八页。EPO的概念EPO的用途及其疗效EPO的纯化历史及工艺流程EPO的销售情情况及其前景第二页，共十八页。什么是EPO？EPO：是促红细胞生成素〔Erythropoietin〕的英文简称。促红细胞生成素：最初是从肾脏中别离出来能刺激前体红细胞增生、分化的一种细胞因子。人体血液中的促红细胞生成素：是由肾脏和肝脏分泌的一种激素样物质，能够促进红细胞生成。它与其受体(EPO-R)结合后共同介导缺氧的生理反响。第三页，共十八页。EPO的用途医疗用途：增加红血球的数目，用于贫血、组织断离、早产儿，用在癌学和血液学方面。体育用途(兴奋剂)：增加训练耐力和训练负荷，属于国际奥委会规定的违禁药物。在2022年北京奥运会中第一例的兴奋剂。第四页，共十八页。EPO的疗效1、肾性贫血患者EPO水平较低，在进行治疗过程中，往往通过注射EPO来提高体内EPO水平进行治疗，从而帮助病人增加红细胞数量，此时EPO水平有所上升。2、其他贫血如缺铁性贫血、巨细胞性贫血患者EPO水平不降低，但也可以使用EPO治疗，此时浓度也会有所升高。3、再生障碍性贫血和骨髓造血功能不全患者EPO水平升高。第五页，共十八页。EPO的纯化历史1、Miyake的七步法：纯化步骤太多，对设备及操作要求也较高，不适合工业生产的特点。2、Spivik利用凝集素亲和层析纯化EPO：由于凝集素亲和层析凝胶易被杂蛋白不可逆吸附，使得别离效果降低，本钱增高，也不利于大规模生产。3、近年来那么利用三步层析法三步纯化根本流程等。第六页，共十八页。EPO的工艺流程——①三步层析法1、染料配基亲和层析→反相疏水层析→离子交换层析;2、染料配基亲和层析→反相疏水层析→分子筛层析;3、反相疏水层析→离子交换层析→分子筛层析。第七页，共十八页。EPO的工艺流程——②三步纯化根本流程第一步：反相柱色谱样品浓缩约96.7%透析第二步：DEAE-离子交换色谱第三步：分子筛色谱总回收率〉30%比活1.5*108U/g蛋白第八页，共十八页。第一步：反相色谱C6反相柱〔2cm*2cm〕〔创新生物技术公司〕流程：上样50ml/min〔柱结合量约5mg蛋白/ml介质)去离子水平衡至检测基线10%~80%乙醇胍线性梯度洗脱检测并收集含EPO主峰ELISA测定第九页，共十八页。透析透析液：10倍体积的10mmol/LTris.HCl(pH7.5)-2%蔗糖缓冲液透析次数：2时间：5~6h第十页，共十八页。第二步：离子交换柱DEAE型离子交换柱流程：10mmol...
