HBcAg的检测与应用检验科胡亚第一页,共四十二页。摘要HBcAg存在于Dane颗粒的核心,是HBV的结构蛋白即病毒核壳蛋白,具有重要的生物学特性和临床病理意义,HBcAg由HBV基因组的C开放读码区〔ORF〕编码,具有高度免疫原性,对HBcAg的免疫应答在病毒去除中有重要作用。血清HBcAg阳性可提供肝内HBV合成的信息,是病毒存在的直接标志,HBcAg感染的肝细胞是细胞免疫效应攻击的靶细胞,肝细胞溶解后HBcAg可直接释放入血,故能直接反映肝细胞损害和病情进展的程度。检测肝组织HBcAg有助于确定乙型肝炎病原学诊断和评估肝细胞坏死炎性活动的程度及病变开展的趋向,推测慢性乙型肝炎的预后。血清和肝组织HBcAg检测具有多种实用价值,值得推荐。第二页,共四十二页。0引言乙型肝炎病毒〔HBV〕是嗜肝DNA病毒,完整的HBV颗粒又称Dane颗粒,球形,直径约42urn。HBV核心抗原〔HepatitisBCoreAntigen,HBcAg〕存在于Dane颗粒的核心,是HBV的结构蛋白即病毒核壳蛋白,主要存在于受感染的肝细胞核内,它反映血清中Dane颗粒的存在及肝内HBV的复制。存在于乙型肝炎患者血液和肝组织内的HBcAg具有重要的生物学特性和临床病理意义。第三页,共四十二页。1生物学特性1.1一般特性HBcAg由HBV基因组的C开放读码区〔ORF〕编码,从第二个ATG〔1901nt〕起始翻译〔终止密码子在2458nt〕。HBcAg有保守的三维结构,可因血清型不同而有183-185个氨基酸残基〔aa〕,相对分子质量Mr21,000,180个HBcAg形成27nrn的正20面体以构成核心颗粒。HBV核心局部含有环状双股DNA、DNA聚合酶、HBcAg和e抗原〔HBeAg〕,是病毒复制的主体。HBcAg包装HBVDNA,在病毒成熟过程中起重要作用。HBcAg己被证明含有HBV特异性DNA聚合酶,是HBV复制的标志。第四页,共四十二页。1.1一般特性HBcAg可在受染的肝细胞核中查到,但它主要在胞质中产生,由胞核定位序列〔nuclearlocalizationsequences,NLS〕介导HBcAg进人细胞核中。胞核定位序列位于HBcAg的羧基末端区〔C端区〕第145-156位和第172-183位的氨基酸序列,具有与细胞核特异性结合,并将与之相连的蛋白或DNA转运到细胞核中的功能。第五页,共四十二页。1.2免疫反响HBcAg具有高度免疫原性,在T细胞和B细胞水平上,HBcAg的抗原性较HBeAg强100倍,几乎所有HBV感染者都产生抗-HBc,同时有T细胞免疫应答。对HBcAg的免疫应答在病毒去除中可能有重要作用。这对HBcAgDNA的疫苗研究有重要的指导意义。第六页,共四十二页。1.2免疫反响Th细胞根据其的分泌细胞因子...