PCR技术在乙肝方面的应用TheapplicationofPCRtechniqueinHBV涿州市医院检验科刘鹏年第一页,共五十五页。HepatitisBVirus乙型肝炎的病原体在全世界广泛流行,估计全球半数以上人口已被HBV感染过。中国:乙肝高发区,人群HBsAg的检出率达9.8%第二页,共五十五页。乙型肝炎病毒感染的现状全球约有3.5亿人感染乙型肝炎病毒,中国有1.2亿人感染,其中每年约有1-2%会出现肝硬化或肝癌而死亡。乙型肝炎是一种严重危害人类健康的传染病,它是由乙肝病毒(HBV)感染引起的。全世界乙肝携带者达5亿之多,我国是乙肝携带者高于人群的10%。急性乙肝中有20%会转为慢性,进而可能开展为肝硬化和肝癌,因此,准确、迅速诊断对乙肝的治疗和预后显得极为重要。第三页,共五十五页。第四页,共五十五页。乙型肝炎病毒属嗜肝DNA病毒科〔hepadnaviridae〕,基因组长度3.2kb目前感染人类最小的DNA病毒局部双链环状DNA。第五页,共五十五页。HBV基因及编码蛋白第六页,共五十五页。HepatitisBVirus第七页,共五十五页。第八页,共五十五页。乙肝的实验室诊断〔一〕生化学检查〔二〕HBV血清学检查〔三〕HBVDNA、基因型和变异检查第九页,共五十五页。生化学检查ALT和AST血清胆红素凝血酶原时间〔PT〕及PTA胆碱酯酶血清白蛋白甲胎蛋白〔AFP〕第十页,共五十五页。生化检测的局限性敏感度有限代表肝细胞损害,水平上下不能代表肝储藏能力关于“胆酶别离〞现象第十一页,共五十五页。HBV血清学检查工程:HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc以及抗-HBcIgM方法ELISA(enzyme-linkedimmunosorbentassay,最常用,定性)发光免疫分析(定量)第十二页,共五十五页。HBsAg–感染的标志Anti-HBs–既往感染/接种疫苗Anti-HBcIgM–急性感染标志Anti-HBcIgG–既往或慢性感染HBeAg–急性病毒复制,有传染性Anti-HBe–病毒不再复制HBV-DNA–急性病毒复制,比HBeAg更准确;主要用于监测治疗反响第十三页,共五十五页。血清学检测的临床意义HBsAg抗-HBsHBeAg抗-HBe抗-HBc临床意义急性或慢性感染(大三阳)+-+-++++乙肝后期或慢性感染(小三阳)--++---潜伏期或急性乙肝早期--+++痊愈或恢复期,有免疫力-----+++--痊愈,有免疫力疫苗接种或曾经感染过,有免疫力第十四页,共五十五页。血清学检测的局限性HBV具有“检测窗口期〞假阴性结果无法检测突变株及抗体第十五页,共五十五页。SymptomsHBeAganti-HBeIgGanti-HBcIgManti-HBcanti-HBsHB...