细胞培养的基本知识、细胞培养的基本知识、基本基本(jīběn)(jīběn)技术技术医学院中心(zhōngxīn)实验室谷景义第一页，共六十八页。主要(zhǔyào)内容：•1、细胞培养基本知识•2、培养细胞(xìbāo)生长的条件•3、细胞培养的基本技术第二页，共六十八页。一、一、细胞培养细胞培养把取得的组织用机械或消化的方法分散成单个细胞，用培养基制成细胞悬液，在体外适宜条件下，使细胞生长繁殖，并保留其一定(yīdìng)的结构和功能特性。第三页，共六十八页。培养细胞的特性培养细胞的特性1-1-生长方式生长方式(fāngshì)(fāngshì)及类型及类型贴附型、悬浮(xuánfú)型第四页，共六十八页。培养培养(péiyǎng)(péiyǎng)细胞的特性细胞的特性2-2-增殖特点增殖特点体外培养的细胞(xìbāo)既保持了一定的体内细胞(xìbāo)的基本特性，但也具有本身的一些特点。贴附-伸展接触抑制-增殖的密度抑制第五页，共六十八页。贴附贴附--伸展伸展(shēnzhǎn)(shēnzhǎn)第六页，共六十八页。接触抑制当一个细胞被其他细胞围绕导致无处可去而保持接触时，细胞不再移动，在接触区域的细胞膜活动将停止(tíngzhǐ)。因此，一般正常细胞并不相互重叠于其上生长。第七页，共六十八页。细胞增殖密度(mìdù)抑制•当细胞生长汇合形成单层时，细胞变得比较拥挤，这时其分裂停止，这种细胞可在静止(jìngzhǐ)状态下维持存活一段时间，但不会继续分裂生殖。•转化细胞或恶性肿瘤细胞与正常细胞不同，他们的接触抑制和增殖密度抑制常常降低，因而可以增殖至较高的终末细胞密度。第八页，共六十八页。培养细胞培养细胞(xìbāo)(xìbāo)的特性的特性3-3-生长过程生长过程•单个细胞(xìbāo)增殖：细胞周期细胞周期第九页，共六十八页。高等(gāoděng)生物体，细胞周期时间的长短变化主要集中在G1期，S，G2和M期基本保持稳定。Hela8-16h5-9h2-8h20-28h第十页，共六十八页。一群细胞的增殖(zēngzhí)：细胞生长曲线•接种后，每天进行检测计数，以细胞数为纵坐标，以时间为横坐标，绘制成曲线。•测定细胞绝对生长数的常用方法，也是判定细胞活力的重要指标，是培养细胞生物学特性的基本参数之一。•饱和密度(mìdù)：在特定条件下，培养器皿内能达到的最高细胞数，当细胞达到饱和密度后细胞群体停止繁殖。第十一页，共六十八页。•潜伏期/滞留期•指数增长期•平台(píngtái)期/停滞•退化或死亡第十二页，共六十八页。•细胞系的生长过程细胞系的生长...
