第一页，共九十一页。主要通过检测什么检测大肠杆菌(dàchánǎnjūn)ɡɡ：1、菌落数量2、大肠杆菌生成物间接检测(β-半乳糖苷酶,β-葡萄糖醛酸酶)3、表面抗原4、DNA主要(zhǔyào)通过检测什么检测大肠杆菌第二页，共九十一页。1、芯片(xīnpiàn)化的大肠杆菌检测法1.1、在线富集技术在微流控芯片上实现(shíxiàn)低浓度细菌微生物超灵敏检测背景：由于在水、食品和临床样品病菌的感染剂量可能非常低,为了能够快速测量存在于实际样品中低浓度的病原(bìngyuán)微生物,科研工作中己经投入了相当大的精力到这一领域。本文通过将壳聚糖(CS)扫集,反转电场堆积和场放大样品堆积多步浓缩方法联合,在芯片上实现了细菌的高效检测。（了解）第三页，共九十一页。由于CS（壳聚糖）带有大量正电荷因此常被用于絮凝吸附剂和不同作用的绑定试剂。因为在细菌和病毒细胞外膜表面具有羟基和磷酸根基团,常使其带负电荷,CS与细胞可通过静电作用可使其聚集。并且CS也常作为天然抗菌剂被大量使用。因此,CS的高吸附能力(nénglì)可使其用于细菌浓缩,并且作为扫集试剂可以保持细胞的活性。此外,通过将CS扫集、场放大样品堆积和反转电场富集技术联合使用,在微流控芯片上一体化实现了多步浓缩检测方法。（知道）第四页，共九十一页。材料和仪器三羟基甲基氨基甲烧(Tris),硼酸,乙二胺四乙酸(EDTA)购买于Aldrich公司(Milwaukee,WI,USA)。壳聚糖,牛璜酸和半胱氨酸购买于上海国药集团。大肠杆菌(dàchánǎnjūn)ɡɡ、E.coli)购买于广东微生物种质资源库。所有的实验在自制的微流控-激光诱导焚光检测系统(MCE)上实施。微流控系统主要由上海光谱有限公司提供。(了解)第五页，共九十一页。细菌悬浮液的准备：大肠杆菌在LB培养基30度下培养13h。在3400rpm（每分钟转数）离心5min,上清液去除,再次用无菌水对细胞进行清洗,离心,重复(chóngfù)这个过程5次以去除残留的培养基并且达到清洗细胞的目的。近红外核酸荧光染料SYTO62用来标记细菌细胞。最后,标记的细菌细胞悬浮在含有牛磺酸的缓冲溶液,浓度约1.0x107CFU/mL。在每次使用之前,新准备的细胞悬浮液需要漩祸60-90S以避免细胞聚集。（了解）第六页，共九十一页。微流控芯片系统的条件：用于实验的“十字”通道微流控芯片微通道深为25宽为100um。分离通道长为50mm,其他通道与交叉口的距离为10mm。铂电极作为电源与溶液之间的导电电极。芯片使用之前需要用98%的浓硫酸和去离子水各冲洗10min。随后,用1mol/LNaOH冲洗通道20min...
