第49卷第2期2023年3月吉林大学学报（医学版）JournalofJilinUniversity（MedicineEdition）Vol.49No.2Mar.2023DOI：10.13481/j.1671⁃587X.20230213鹿茸多肽预处理通过miR-133a调控TGF-β/Smad信号通路对TBHP诱导心肌H9c2细胞损伤的保护作用周高峰1,肖静1,2,周佳1,刘俊秀1,律广富3,王雨辰1,林贺1,黄晓巍1（1.长春中医药大学药学院临床药学与中药药理教研室，吉林长春130117；2.中国医学科学院药用植物研究所，北京100094；3.长春中医药大学吉林省人参研究科学院中药药理组，吉林长春130117）［摘要］目的目的：探讨鹿茸多肽（VAP）预处理对叔丁基过氧化氢（TBHP）诱导大鼠心肌H9c2细胞损伤的保护作用，阐明VAP对miR-133a/转化生长因子β（TGF-β）/Smad轴的作用及其机制。方法方法：将H9c2心肌细胞分为空白对照组、空白血清组、TBHP组、TBHP+低剂量（100mg·kg－1）VAP组、TBHP+高剂量（400mg·kg－1）VAP组和miR-133抑制剂（miR-133inhibitor）组。空白对照组不做任何处理，其余各组细胞经VAP处理24h后，给予200μmol·L－1TBHP处理；miR-133inhibitor组细胞转染miR-133inhibitor24h，给予400mg·kg－1VAP处理24h，并给予200μmol·L－1TBHP处理。MTT法检测各组H9c2细胞存活率，酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测各组细胞培养上清液中肌钙蛋白T（cTnT）、肌钙蛋白I（cTnI）和肌酸激酶同工酶（CK-MB）水平，实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测各组H9c2细胞中miR-133表达水平，Westernblotting法检测各组H9c2细胞中转化生长因子β1（TGF-β1）、磷酸化Smad2/3（p-Smad2/3）和Smad4蛋白表达水平。结果结果：MTT法检测，与TBHP组比较，TBHP+低剂量VAP组和TBHP+高剂量VAP组H9c2细胞存活率升高（P<0.05），miR-133inhibitor组H9c2细胞存活率差异无统计学意义（P>0.05）。ELISA法检测，与空白对照组比较，TBHP组H9c2细胞中cTnT、cTnI和CK-MB水平升高（P<0.05）；与TBHP组比较，TBHP+低剂量VAP组和TBHP+高剂量VAP组H9c2细胞中cTnT、cTnI和CK-MB水平降低（P<0.05）。RT-qPCR法检测，与空白对照组比较，TBHP组H9c2细胞中miR-133a表达水平降低（P<0.05）；与TBHP组比较，TBHP+低剂量VAP组和TBHP+高剂量VAP组H9c2细胞中miR-133a表达水平升高（P<0.05或P<0.01），miR-133inhibitor组H9c2细胞中miR-133a表达水平明显降低（P<0.01）。Westernblotting法检测，与空白对照组比较，TBHP组H9c2细胞中TGF-β1、p-Smad2/3和Smad4蛋白表达水平升高（P<0.05）；与TBHP组比较...
