2023年2月第29卷第2期February.2023Vol.29No.2金龙胆草醇提取物对慢性牙周炎的体外抑菌抗炎作用研究*陈海鹰1，汪龙凤1，林清凡2，王伟德1，付东杰3（1.泉州医学高等专科学校口腔医学院，福建泉州362000；2.泉州医学高等专科学校科技中心，福建泉州362000；3.武汉大学人民医院，湖北武汉430000）[摘要]目的：探讨金龙胆草醇提取物对慢性牙周炎常见致病菌牙龈卟啉单胞菌（Pg）、具核梭杆菌（Fn）的体外抑菌效果，观察金龙胆草醇提取物对牙龈卟啉单胞菌脂多糖（Pg-LPS）诱导人牙龈成纤维细胞（HGF）炎症反应的影响。方法：以乙醇为提取剂，采用索式提取法、热水浴浸提法和超声辅助提取法对金龙胆草进行提取，冷冻干燥后计算提取率；使用滤纸片扩散法观察提取物对Pg、Fn的抑菌效果；采用细胞计数试剂-8（CCK-8）检测金龙胆草醇提取物和Pg-LPS、HGF共同培养24h、48h对细胞增殖的影响；通过酶联免疫吸附试验检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、前列腺素E2（PGE2）分泌水平；应用蛋白免疫印迹法（Westernblotting）检测HGF炎症模型中核因子-кB（NF-кB）、基质金属蛋白酶-1（MMP-1）蛋白表达水平，分析金龙胆草醇提取物对NF-кB信号通路的抑制情况。结果：3种提取方式的金龙胆草提取率比较，超声辅助提取法显著高于索式提取法和热水浴浸提法（P<0.05）。金龙胆草醇提取物对Pg、Fn的最小抑菌浓度分别为20mg/mL和40mg/mL，索式提取法的抑菌效果优于超声辅助提取法和热水浴浸提法。干预24、48h后，10、20、50μg/mL药液组HGF活性与对照组比较，差异无统计学意义（P>0.05）；100、200、500、1000μg/mL药液组HGF活性显著低于对照组（P<0.05）。干预12、24h后，Pg-LPS组HGF培养液上清液中TNF-α、IL-1β、PGE2水平均高于对照组（P<0.05）；干预12、24h后，Pg-LPS+20μg/mL药液组、Pg-LPS+50μg/mL药液组TNF-α水平均低于Pg-LPS组（P<0.05）；干预12h后，Pg-LPS+10μg/mL药液组、Pg-LPS+20μg/mL药液组、Pg-LPS+50μg/mL药液组IL-1β水平均明显低于Pg-LPS组（P<0.05）；干预12、24h后，Pg-LPS+10μg/mL药液组、Pg-LPS+20μg/mL药液组、Pg-LPS+50μg/mL药液组PGE2水平均低于Pg-LPS组（P<0.05）。干预12、24h后，Pg-LPS组HGF中NF-κB、MMP-1蛋白相对表达量均高于对照组（P<0.05）；干预12、24h后，Pg-LPS+10μg/mL药液组、Pg-LPS+20μg/mL药液组、Pg-LPS+50μg/mL药液组NF-κB、MMP-1蛋白相对表达量均低于Pg-LPS组（P<0.05）...
