·分子生物学·doi:10．13819/j．issn．2096－708X．2023．02．004■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■引用本文格式:李丛彬，唐博，肖海军，等．姜黄素促进肌腱干细胞的体外增殖及成骨分化［J］．湖北医药学院学报，2023，42(2):131－136．姜黄素促进肌腱干细胞的体外增殖及成骨分化李丛彬1，唐博2，肖海军3(1安徽理工大学医学院，安徽淮南232001;2南方医科大学第三临床医学院，广东广州510000;3上海市奉贤区中心医院，上海201490)［摘要］目的:研究姜黄素对肌腱干细胞(tendonstemcells，TSCs)生物学行为的影响。方法:分离、培养大鼠TSCs，将不同浓度姜黄素溶液的完全培养基与TSCs共培养，通过CCK8法检测细胞增殖情况，确定姜黄素溶液的最适浓度;将TSCs与10μmol/L姜黄素共培养，0μmol/L姜黄素处理组作为对照组，通过碱性磷酸酶(alkalinephos-phatase，ALP)染色和活性检测评估其早期成骨分化水平;使用茜素红染色评估成骨分化晚期细胞外基质矿化情况;利用实时荧光定量逆转录PCＲ检测细胞成骨诱导14d时成骨指标骨形态发生蛋白(bonemorphogeneticprotein2，Bmp2)、核心结合因子α1(corebindingfactoralphalα1，Ｒunx2)、骨钙素(osteocalcin，Ocn)和Y染色体性别决定区－盒转录因子9(SＲY－boxtranscriptionfactor9，Sox9)的表达;通过蛋白免疫印迹检测Ｒunx2、Ocn和Sox9成骨相关基因的蛋白表达。结果:成功分离培养TSCs;CCK8结果显示含不同浓度姜黄素溶液的培养基中的TSCs均能持续增殖，但从20μmol/L姜黄素组开始，后续浓度姜黄素组的细胞增殖能力明显下降(P＜0．01)，后续选择10μmol/L姜黄素组作为实验浓度;ALP活性检测及染色结果显示姜黄素组细胞的ALP活性高于对照组(P＜0．001);茜素红染色结果显示姜黄素组的细胞外基质矿化水平高于对照组;实时荧光定量逆转录PCＲ结果显示姜黄素组细胞的相关成骨基因Bmp2、Ｒunx2、Ocn和Sox9的表达均高于对照组(P＜0．05);蛋白免疫印迹结果表明Ｒunx2、Ocn和Sox9成骨相关基因的蛋白表达均高于对照组(P＜0．01)。结论:姜黄素能够促进TSCs的体外增殖及成骨分化。［关键词］姜黄素;肌腱干细胞;骨肌腱接点;成骨分化［基金项目］上海市奉贤区脊柱伤病微创临床诊疗中心项目(fxlczlzs－a－202103)［作者简介］李丛彬(1995－)，男，安徽六安人，硕士研究生...
