2023年第13期现代园艺试验研究鸡头黄精不同外植体诱导愈伤组织研究赵鹏达,李婷,史晓丹,冯晨露,赵一帆,陈苏丹*(河南科技大学园艺与植物保护学院,河南洛阳471000)摘要:以鸡头黄精的根状茎、叶片、种子为外植体,采用不同的消毒方法,选择不同浓度的培养基进行诱导愈伤组织试验。结果表明,不同外植体经消毒处理后,均可诱导愈伤组织。其中以带芽点的根状茎诱导效果最好,而种子诱导效果不佳且所需时间长。根状茎诱导愈伤组织最有效的方案为:75%酒精消毒0.5min+0.2%HgCl2消毒10.0min组合消毒处理,针对诱导愈伤组织则选择MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L+2,4-D1.0mg/L的培养基;叶片消毒选择75%酒精消毒0.5min+0.1%HgCl2消毒6.0min的处理,筛选得到合适的诱导培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.5mg/L+2,4-D1.5mg/L;种子消毒处理的最优方案为:75%酒精消毒0.5min+0.1%HgCl2溶液消毒8.0min,筛选得到的最佳培养基配方为:MS+6-BA4.0mg/L+GA30.5mg/L+NAA0.25mg/L。关键词:诱导愈伤;鸡头黄精;外植体种效率,缩短新品种的育成年限,提供足够的健康种苗,从而改善当前鸡头黄精栽培生产的现状。1材料与方法1.1试验材料从河南省洛阳市栾川县采集健壮、无病害的鸡头黄精植株及休眠期种子,随后转移至河南科技大学开元校区,实施统一的管理。1.2试验方法1.2.1根状茎消毒和初代培养。从土地中挖取长势良好的鸡头黄精根状茎,用毛刷刷洗其表面的泥土,使用去污粉清洗3遍,去污粉浸泡30.0min[6],用流水冲洗30.0min。随后将预处理完成后的根状茎置于超净工作台完成1cm×1cm带芽小块的切分,然后用75%酒精浸泡0.5min→用无菌水冲洗1遍→用0.2%HgCl2处理6.0~12.0min[5]→无菌水冲洗3次。将与HgCl2接触的切面部分切掉,在根状茎下方1cm接种,置于以MS为基本培养基中,附加不同浓度的6-BA(2.0mg/L、3.0mg/L)、2,4-D(0.5mg/L、1.0mg/L、1.5mg/L)、NAA(0.5mg/L、1.0mg/L、1.5mg/L),共6组处理。于温度25℃条件下培养,先在遮光条件下培养2d,后于光照16h、光照度1200Lux条件下培养,重复3次。持续7d后,即统计污染率,持续30d后,即可统计诱导率。1.2.2叶片消毒和初代培养。获取新鲜叶片,随后将其置于流水下,刷洗表面、背面,使用去污粉清洗1遍,去污粉浸泡10.0min,再用流水冲洗30.0min。将预处理过的叶片放在超净工作台上,用75%酒精浸泡0.5min→用无菌水冲洗1遍→用0.1%HgCl2处理4.0~8.0min→无菌水冲洗3次。消毒完成后的叶片去除叶缘,并以5mm×5mm小片切...