何允等/家蚕几丁质去乙酰化酶BmCDA2的基因表达和免疫定位ChineseJournalofBiotechnologyhttp://journals.im.ac.cn/cjbcnApr.25,2023,39(4):1655-1669DOI:10.13345/j.cjb.220472©2023ChinJBiotech,Allrightsreserved资助项目：国家自然科学基金(31872429)；重庆市自然科学基金(cstc2021jcyj-msxmX1166)ThisworkwassupportedbytheNationalNaturalScienceFoundationofChina(31872429)andtheNaturalScienceFoundationofChongqing(cstc2021jcyj-msxmX1166).*Correspondingauthor.E-mail:gongjing@swu.edu.cnReceived:2022-06-14;Accepted:2022-07-28;Publishedonline:2022-08-031655生物工程学报家蚕几丁质去乙酰化酶BmCDA2的基因表达和免疫定位何允1,3，陈怡菲1,3，王清浪1,3，张自钰1,3，董浩南1,3，申太霞1,3，侯勇1,3，龚竞1,2*1西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室，重庆4007152西南大学蚕桑纺织与生物质科学学院，重庆4007153西南大学前沿交叉学科研究院生物学研究中心，重庆400715何允,陈怡菲,王清浪,张自钰,董浩南,申太霞,侯勇,龚竞.家蚕几丁质去乙酰化酶BmCDA2的基因表达和免疫定位[J].生物工程学报,2023,39(4):1655-1669.HEYun,CHENYifei,WANGQinglang,ZHANGZiyu,DONGHaonan,SHENTaixia,HOUYong,GONGJing.GeneexpressionandimmunolocalizationofchitindeacetylaseBmCDA2insilkworm[J].ChineseJournalofBiotechnology,2023,39(4):1655-1669.摘要：几丁质的去乙酰化修饰与昆虫的发育变态密切相关，几丁质去乙酰化酶(chitindeacetylase,CDA)是这个过程中的关键酶。家蚕(Bombyxmori)是鳞翅目昆虫的代表性昆虫，目前对家蚕CDAs的研究较少。为了更好地揭示BmCDAs对家蚕变态发育的作用，本研究采用生物信息学分析、蛋白表达纯化以及免疫荧光定位等方法对表皮中高量表达的BmCDA2进行了研究。结果发现，BmCDA2有两种mRNA拼接形式BmCDA2a和BmCDA2b，分别在幼虫眠期和化蛹期表皮高量表达，两个基因均有几丁质去乙酰化酶催化结构域(catalyticdomain)、几丁质结合结构域(chitinbindingdomain)和低密度脂蛋白受体结构域(lowdensitylipoproteinreceptordomain)；Westernblotting结果显示，该蛋白在表皮存在，荧光免疫定位发现BmCDA2蛋白随着幼虫新表皮的生成而逐渐增多，推测BmCDA2可能参与了幼虫新表皮的形成。该结果丰富了家蚕CDAs的生物学功能信息，也为其他昆虫CDA的研究提供一些有价值的参考。关键词：家蚕；几丁质去乙酰化酶2；原核表达；免疫荧光...
