实用医学杂志2023年第39卷第9期TheJournalofPracticalMedicine2023Vol.39No.9doi：10.3969/j.issn.1006⁃5725.2023.09.002项目基金：武汉市医学科研项目（编号：WX20D26）通信作者：李伟E⁃mail：lw523626@163.comTspan1通过诱导细胞自噬拮抗奥沙利铂诱导的结直肠癌细胞凋亡李孝平周红见高芳芳李伟武汉市第三医院肝胆胰甲状腺胃肠外科（武汉430047）【摘要】目的探讨四次跨膜蛋白1（Tspan1）过表达对奥沙利铂（OXA）诱导的人结直肠癌细胞系HCT116细胞凋亡的影响并分析其可能作用机制。方法将Tspan1过表达质粒及其阴性对照空载质粒分别转染至HCT116细胞中，qRT⁃PCR和Westernblot法检测胞中Tspan1mRNA及其蛋白表达水平。采用14.15μg/mLOXA或联合5mmol/L自噬抑制剂3⁃MA干预转染后HCT116细胞，MTT检测细胞增殖活性；流式细胞术检测细胞凋亡水平；免疫荧光检测细胞中LC⁃3B蛋白表达情况；Westernblot法检测细胞中自噬相关蛋白LC⁃3、Beclin1和p62蛋白表达水平。结果Tspan1过表达可显著上调HCT116细胞中Tspan1mRNA和蛋白表达水平，降低HCT116细胞对OXA的敏感性，抑制OXA诱导的HCT116细胞凋亡，并增强细胞中LC3B蛋白荧光强度，上调细胞中LC⁃3II/LC⁃3I比值及Beclin1蛋白表达水平，下调p62蛋白表达水平。然而，联合3⁃MA处理可逆转Tspan1过表达对OXA诱导HCT116细胞凋亡的抑制作用，提高细胞对OXA的敏感性。结论Tspan1过表达可拮抗OXA诱导的HCT116细胞凋亡，其机制可能是通过诱导细胞自噬来实现的。【关键词】结直肠癌；四次跨膜蛋白1；奥沙利铂；自噬；凋亡【中图分类号】R735.34Tspan1antagonizesoxaliplatin⁃inducedapoptosisincolorectalcancercellsbyinducingcellularautophagyLIXiaoping，ZHOUHongjian，GAOFangfang，LIWei.DepartmentofHepatobiliaryPancreaticThyroidGastrointes⁃tinalSurgery，Wuhan430074，ChinaCorrespondingauthor：LIWeiE⁃mail：lw523626@163.com【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheeffectoftetraspanin1（Tspan1）overexpressiononoxaliplatin（OXA）⁃inducedapoptosisinhumancolorectalcancercelllineHCT116andtoanalyzeitspossiblemechanismofaction.MethodsHCT116cellsweretransfectedwithTspan1overexpressionplasmidanditsnegativecontrolvec⁃torplasmid.TheexpressionlevelsofTspan1mRNAandproteinweredetectedbyqRT⁃PCRandWesternblot.ThetransfectedHCT116cellsweretreatedwith14.15μg/mLOXAorcombined...
