收稿日期:2022－06－14修回日期:2022－11－25基金项目:国家自然科学基金项目(32060786、31660723);贵州省科技计划项目(黔科合支撑［2021］一般161号);贵州省优秀青年科技人才项目(黔科合平台人才［2021］5646)．作者简介:宋春(1994—)，女．研究方向:动物疫病．Email:1061655121@qq．com．通信作者程振涛(1979—)，男，教授．研究方向:动物病原病理．Email:chengzhentao@sohu．com．鸡毒支原体PstS蛋白的原核表达及其定位宋春1，杨美1，岳筠2，单春兰1，王开功1，3，程振涛1，3(1．贵州大学动物科学学院，贵州贵阳550025;2．贵州省动物疫病预防控制中心，贵州贵阳5500083;贵州大学贵州省动物疫病与兽医公共卫生重点实验室，贵州贵阳550025)摘要:通过SOE-PCＲ技术获得PstS基因全长并克隆到pColdⅠ，将重组表达载体pCold-PstS转化进BL21(DE3)后经IPTG诱导表达融合蛋白PstS，将其纯化后免疫新西兰兔制备多克隆兔抗血清，提取鸡毒支原体总蛋白、膜蛋白和胞浆蛋白，通过Westernblot分析PstS蛋白的亚细胞定位．结果表明，PstS基因长度为1065bp，其蛋白在氨基酸9～31之间存在跨膜区，pCold-PstS经诱导表达获得融合蛋白PstS(存在于细胞膜和胞浆中)，其约43ku并具有较好的抗原性．PstS蛋白是鸡毒支开放科学(资源服务)标识码(OSID)原体膜表面的免疫原性蛋白，可为进一步研究其生物学功能和基因工程疫苗提供依据．关键词:鸡毒支原体;PstS基因;原核表达;亚细胞定位中图分类号:S852．62文献标识码:A文章编号:1671-5470(2023)03-0344-07DOI:10．13323/j．cnki．j．fafu(nat．sci．)．2023．03．009ProkaryoticexpressionandlocalizationofMycoplasmagallisepticumPstSproteinSONGChun1，YANGMei1，YUEJun2，SHANChunlan1，WANGKaigong1，3，CHENGZhentao1，3(1．CollegeofAnimalScience，GuizhouUniversity，Guiyang，Guizhou550025，China;2．GuizhouProvincialCenterforAnimalDiseaseControlandPrevention，Guiyang，Guizhou550008，China;3．GuizhouKeyLaboratoryofAnimalDiseaseandVeterinaryPublicHealth，GuizhouUniversity，Guiyang，Guizhou550025，China)Abstract:ThefulllengthofPstSgenewasfirstlyamplifiedbySOE-PCＲandclonedintoexpressionvectorpColdⅠ．ThenthevectorpCold-PstSwastransformedintoBL21(DE3)toexpressthefusionproteinPstSbyIPTGinduction，basedonwhichpolyclonalrabbitanti-serumwasgeneratedbyimmunizingNewZealandrabbitwitht...
