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基于斑马鱼模型探究多花黄精多糖的免疫调节作用_张雪.pdfVIP免费

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基金项目:国家重点研发计划项目(2018YFC1706500)作者简介:张雪(1998.11—),女,硕士研究生在读,研究方向:中药品质评价,E⁃mail:zhangxuezyhx@163.com通信作者:马志强(1968.12—),男,博士,研究员,研究方向:中药药效物质基础研究,E⁃mail:mazq1968@sina.com实验研究基于斑马鱼模型探究多花黄精多糖的免疫调节作用张雪1,2赵苑伶1,2陈林珍1,2刘妍1,2刘静1,2赵崇军1,2刘永刚1马志强1,2(1北京中医药大学中药学院,北京,102488;2中药品质评价北京市重点实验室,北京,102488)摘要目的:探讨多花黄精多糖(PolygonatumCyrtonemaHuaPolysaccharides,PCP)及PCP⁃1对氯霉素所致免疫损伤的保护作用。方法:采用水提醇沉法得到黄精粗多糖,除蛋白脱色素后,得到PCP。利用DEAE⁃SepharoseFastFlow层析柱和HW⁃55F凝胶柱先后对PCP进行洗脱,收集洗脱液,减压浓缩,冷冻干燥后得到纯化的PCP⁃1。以受精后2d(2dpf)的转基因斑马鱼为实验动物,采用不同浓度的氯霉素处理,通过比较斑马鱼尾部中性粒细胞的数目,确定氯霉素的最优造模剂量,建立斑马鱼免疫抑制模型。分别加入不同浓度的PCP和PCP⁃1孵育24h后,拍照统计斑马鱼泄殖腔至尾部中性粒细胞数目,观察PCP和PCP⁃1的免疫调节作用。结果:PCP⁃1为均一多糖,分子量为3350Da。与溶剂对照组比较,氯霉素组的中性粒细胞数目显著减少(P<0.01);与氯霉素组比较,在实验剂量范围内,PCP和PCP⁃1均可以增加斑马鱼体内中性粒细胞的数目(P<0.01),且量效关系明显。结论:PCP和PCP⁃1均具有一定的增强免疫活性及改善免疫损伤的作用。关键词多花黄精;多糖;分离纯化;斑马鱼;免疫调节;中性粒细胞ImmuneFunctionRegulationofPolygonatumcyrtonemaHuaPolysaccharidesBasedonZebrafishModelZHANGXue1,2,ZHAOYuanling1,2,CHENLinzhen1,2,LIUYan1,2,LIUJing1,2,ZHAOChongjun1,2,LIUYonggang1,MAZhiqiang1,2(1School...

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