实验三人体x-染色质的观察第一页,共二十三页。一.实验目的观察与区别X染色质:通过实验初步掌握简易方法,识别其形态及所在部位,为进一步研究人体染色质的畸变与疾病提供参考条件。第二页,共二十三页。1949年Barr等发现,在雌猫的神经细胞核间期有一个凝缩的深染小体,而在雄性的细胞中没有。后来了解,在雌体中的两条X染色体在间期时有一条(或这条的大局部)处于凝集而不活动状态,从而形成了这种X-染色质(或称性染色质、Barr小体)。二.实验原理第三页,共二十三页。1932年美国遗传学家H.J.Muller首先在果蝇中发现了剂量补偿效应,并把它看作是维持雌雄两性生物基因表达的一致所特有的一种遗传效应。剂量补偿效应:在XY型性别决定机制的生物中,使性连锁基因在两种性别中有相等或近乎相等的有效剂量的遗传效应。第四页,共二十三页。进一步研究发现,所有哺乳类雌体细胞中都有一条这种表现的X染色体;Lyon假说:1961年由Lyon提出,又称单个活性X染色体假说。1.正常雌性哺乳动物的体细胞中,两条X染色体中只有一条有活性(activationX,Xa),另一条失活(inactivationX,Xi);2.失活是随机的;3.失活发生在胚胎发育的早期;4.杂合体雌性在伴性基因的作用上是嵌合体。第五页,共二十三页。第六页,共二十三页。人类正常的男女体细胞中,分别有XY和XX性染色体,女性的两条X染色体中,在间期也有一条不表现活性而保持浓缩状态,因此易于用适当的染料加以显示,成为便于观察的X-染色质〔Barr小体〕。在个别的雌或雄体中,有多于2条X染色体时,在间期细胞内除一条外,其余都将形成X-染色质,以维持剂量补偿。第七页,共二十三页。第八页,共二十三页。X-染色质的形态:1.结构致密的浓染小体,轮廓清楚;2.大小约1u左右,常附着于核膜边缘或靠近内侧;3.其形状有微凸形、三角形、卵形、短棒形及双球形;第九页,共二十三页。MALEFEMALE第十页,共二十三页。第十一页,共二十三页。第十二页,共二十三页。三.实验材料1.女性口腔颊部黏膜细胞2.毛发根部细胞第十三页,共二十三页。四.实验仪器及试剂仪器:显微镜试剂:1M盐酸、蒸馏水、改进苯酚品红第十四页,共二十三页。五.实验方法和步骤1.口腔颊部黏膜细胞的观察:a.刮取口腔黏膜细胞:漱口,用牙签从女性口腔两侧颊部刮取上皮黏膜细胞,原位刮2-3次,分别涂抹在干净载片上,每次可涂1-2片,涂抹范围约盖片大小(男性做对照)。b.染色:待稍干后,滴加1-2滴改进苯酚品红,染色10-15分钟。第十五页,共二十三...