胰蛋白酶的脱盐及精制(jīngzhì)方法组员(zǔyuán)：白佳幸张鑫江茹兰、梁美芳1第一页，共十七页。第一页，共十七页。基本(jīběn)简介脱盐精制(jīngzhì)提取(tíqǔ)操作2第二页，共十七页。第二页，共十七页。一、胰蛋白酶(yídànbáiméi)简介•胰蛋白酶系自牛、羊或猪胰中提取的一种蛋白水解酶，这种肽链内切酶，只断裂(duànliè)赖氨酸或精氨酸的羧基参与形成的肽键。•白色或米黄色结晶性粉末，溶于水，不溶于乙醇、甘油、氯仿和乙醚。分子量为24000，最适pH值7.8～8.5左右，当pH>9.0时不可逆失活。Ca2+对酶活性有稳定作用；重金属离子、有机磷化合物、DFP、天然胰蛋白酶抑制剂对其活性有强烈抑制。3第三页，共十七页。第三页，共十七页。作用(zuòyòng)用途•本品为蛋白质水解酶，能选择地水解蛋白质中由赖氨酸或精氨酸的羧基所构成的肽链，能消化溶解变性蛋白质，对未变性的蛋白质无作用，因此，能使脓痰液、血凝块等分解、变稀，易于引流排除，加速创面净化，促进肉芽组织新生，此外还有抗炎症作用。•临床上用于脓胸、血胸、外科炎症、溃疡、创伤性损伤、瘘管等所产生的局部水肿、血肿及脓肿等。喷雾吸入，用于呼吸道疾病。也可用于治疗毒蛇咬伤。还常用于动物(dòngwù)细胞培养前对组织的处理。•工业上用于皮革制造、生丝处理、食品加工等。4第四页，共十七页。第四页，共十七页。二、提取(tíqǔ)操作—分离原理•在动物胰脏中除了存在胰蛋白酶外，还有另外两种与胰蛋白酶性质相似的蛋白水解酶：胰凝乳蛋白酶和弹性蛋白酶。在胰蛋白酶提取过程中，三者彼此很难分开。需采用合适的方法进一步分离纯化。•从动物胰脏中提取胰蛋白酶，一般是用稀酸将胰腺细胞中含有的胰蛋白酶原提取出来(chūlái)，然后根据等电点沉淀的原理将提取液的pH值调至酸性（pH3.0左右），使大量的酸性蛋白沉淀出来(chūlái)。沉淀物经水溶解并调至pH8.0，用极少量的胰蛋白酶将胰蛋白酶原激活，同时溶液中的胰凝乳蛋白酶原和弹性蛋白酶原也被激活，三种酶原相互作用过程如下：5第五页，共十七页。第五页，共十七页。•也可采用从胰脏中提取出胰蛋白酶原，利用合适的提取溶液的pH值促使胰蛋白酶原部分自溶，并通过溶液中Ca2+的环境，使胰蛋白酶原被开始自溶的少量具有活性的胰蛋白酶所激活，转变为具有活性的胰蛋白酶（胰凝乳蛋白酶原及弹性蛋白酶原亦同时被胰蛋白酶激活成有活性的酶）。•激活后的酶溶液再进一步分离(fēnlí)纯化。ClicktoaddTitle6...
