肠杆菌科细菌(xìjūn)鉴定组员(zǔyuán)：李木生，颜大钧，郑伟坛，朱俊林，胡思妙，王荣迎，陈琳蔓第一页，共十八页。第一页，共十八页。肠肠肠ǎū肠肠肠肠肠肠肠肠肠肠未知肠杆菌(gǎnjūn)分离(fēnlí)培养挑取可疑菌落纯培养革兰染色镜检生化实验鉴定药敏试验血清学试验第二页，共十八页。第二页，共十八页。肠肠肠ē肠肠•无菌操作用接种环提取可疑(kěyí)肠道杆菌，在EMB上分区划线接种。送37℃培养24小时。第三页，共十八页。第三页，共十八页。肠肠肠肠肠（一）确定可疑菌落。1.观察(guānchá)EMB表面的菌落特征：（1）.凡紫黑色的单个菌落可初步定为可疑大肠杆菌菌落，标号为。（2）.凡光滑无色透明的单个小菌落可初步定为痢疾杆菌属菌落或伤寒杆菌属菌落，标号为。第四页，共十八页。第四页，共十八页。（二）.可疑菌落纯化培养无菌操作(cāozuò)用接种针挑取已编号可疑菌落，分别接种在双糖铁高层琼脂斜面和半固体培养基上，送37℃温箱培养24~48小时。（三）.双糖铁琼脂斜面培养特征观察与动力观察初步(chūbù)确定为伤寒杆菌初步确定(quèdìng)为大肠杆菌第五页，共十八页。第五页，共十八页。肠肠肠肠肠肠肠挑取纯培养后的可疑菌落(jūnluò)进行革兰染色，确定为革兰阴性菌后进行细菌的细菌的生化培养基接种。生化培养基接种。革兰阴性菌短杆状，分散(fēnsàn)排列第六页，共十八页。第六页，共十八页。肠肠肠肠肠肠将需全面鉴定的可疑细菌从双糖铁琼脂斜面挑菌分别接种于各种(ɡèzhǒnɡ)生化反应培养基。每株可疑菌需接种的培养基计有糖发酵管（葡.乳.麦.甘.蔗）各1支，蛋白胨水1支（I），葡萄糖蛋白胨水2支（M.Vp），枸橼酸盐琼脂斜面1支（C）。接种完毕后，试管置于试管架上，送37℃温箱培养24~48小时后观察记录结果。第七页，共十八页。第七页，共十八页。1.不变黄，小管无气泡：糖发酵(fājiào)为阴性（—）。2.黄色，小管有气泡（产酸，产气）：糖发酵为阳性（+）。黄色，小管无气泡（产酸，不产气）：糖发酵为阳性（+）。糖发酵糖发酵(fājiào)(fājiào)试验试验第八页，共十八页。第八页，共十八页。结果：红色为吲哚试验结果：红色为吲哚试验阳性阳性(yángxìng)(yángxìng)（（++）），无变化为，无变化为阴阴性（性（--））红色为甲基红试验红色为甲基红试验阳性阳性(yángxìng)(yángxìng)（（++）），桔，桔黄色...
