L/O/G/O细胞培养的基本(jīběn)方法第一页，共二十四页。细胞培养的基本概念2细胞培养是指从体内组织取出细胞在体外模拟体内环境下，使其生长繁殖，并维持(wéichí)其结构和功能的一一种培养技术。细胞培养的培养物可以是单个细胞，也可以是细胞群。第二页，共二十四页。细胞培养的目的(mùdì)与用途2一、基础研究(1)药物作用(zuòyòng)机理(2)基因功能(3)疾病发生机理二、科学研究:(1)新药筛选:如药效研究,中药有效成分筛选等.(2)疫苗研究与开发:如肝炎疫苗,艾滋病疫苗，肿瘤疫苗等.(3)基因工程药物与细胞工程药物的研究与开发(4)单克隆抗体制备第三页，共二十四页。细胞培养主要(zhǔyào)的设施器材2设施：超净台、恒温培养箱、倒置显微镜、液氮储存罐、冰柜、恒温水浴槽、离心机、压力蒸汽消毒器。器材：一、玻璃器材玻璃培养皿、刻度吸管、离心管、培养瓶等，（现已较少使用）。二、塑料器材多孔培养板（6,12,24,48,96）、培养皿、培养瓶、离心管、冻存管。三、橡皮器材橡皮制品（最好是硅制品）做各种瓶或试管的塞子(sāizi)、盖子。四、金属器材剪刀、镊子、手术刀、解剖刀、血管钳、组织镊、眼科镊及各种型号针头五、其他物品纱布、注射器、针头、滤头第四页，共二十四页。细胞培养的条件(tiáojiàn)（1）适宜的温度和PH37℃，pH7.2~7.4。（2）气体环境(huánjìng)95%空气+5%CO2;适宜的湿度（无菌水不能干掉）。（CO2：细胞生长所必需的成分,pH值维持，最低不能低于1%（3）营养物质N源、C源、无机盐、维生素、H2O，细胞培养基中含有。常用的细胞培养基：DMEM，RPMI-1640，BME，M199等。（4）无菌条件紫外消毒、空气过滤、无菌滤头，高压灭菌、严格操作。第五页，共二十四页。设施(shèshī)、器材、试剂实物图第六页，共二十四页。培养细胞(xìbāo)的分类按照是否贴壁：贴壁细胞：大多数属此类细胞，如肿瘤细胞、成纤维细胞、平滑肌细胞、细胞等。悬浮细胞：主要为取自血、骨髓(ɡǔsuǐ)、脾的细胞，如白血病细胞。按照传代次数：原代细胞：即从体内取出组织接种培养而未经传代的细胞。（也有人把传代10次之内的细胞统称为原代细胞。）细胞系：指原代细胞培养物经首次传代成功后所繁殖的细胞群体。如HeLa细胞、CHO细胞等。第七页，共二十四页。原代培养(péiyǎng)原理：将动物机体的各种组织从机体中取出，经各种酶（常用胰蛋白酶）、螯合剂（常用EDTA）或机械(jīxiè)方法处理，分散成单细胞，置合适的培养基中培养，使细胞得以...
