第一章血液标本采集与处理临床免疫学检验(jiǎnyàn)技术第一页,共四十三页。第十五章免疫细胞标志和功能(gōngnéng)检测技术刘辉第二页,共四十三页。目录第一节免疫细胞的分离第二节淋巴细胞标志及亚群分类第三节抗原(kàngyuán)提呈细胞的表面标志第四节淋巴细胞的功能检测第五节其它免疫细胞功能检测技术第六节免疫细胞表面标志和功能检测的临床应用第三页,共四十三页。第一节免疫(miǎnyì)细胞的分离第四页,共四十三页。重点(zhòngdiǎn)提示外周血单个核细胞(xìbāo)分离淋巴细胞的分离T、B细胞和T细胞亚群的分离第五页,共四十三页。细胞(xìbāo)分选和基本原理细胞分选和基本原理不同(bùtónɡ)细胞密度不同不同细胞表面生物学特性不同不同细胞表面分化抗原不同第六页,共四十三页。人的红细胞密度(mìdù)为1.093粒细胞密度为1.092单个核细胞(淋巴细胞和单核细胞)的密度为1.076-1.090第七页,共四十三页。第八页,共四十三页。第九页,共四十三页。适用于T、B细胞(xìbāo)的分离已知CD抗原细胞亚群的分离未知CD抗原细胞亚群的分离(阴性分选)第十页,共四十三页。第十一页,共四十三页。第十二页,共四十三页。第十三页,共四十三页。第十四页,共四十三页。第十五页,共四十三页。第十六页,共四十三页。第十七页,共四十三页。第二节淋巴细胞标志(biāozhì)及亚群分类第十八页,共四十三页。CD3+CD4+CD8-辅助性T细胞(xìbāo)(helpTcell,Th)CD3+CD4-CD8+细胞毒性T细胞(cytotoxicTcell,TcorCTL)CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(regulatoryTcell,TrorTreg)第十九页,共四十三页。CD19、CD20、CD21、CD22和CD23等。以CD5为标志结合CD19或CD20可将B细胞(xìbāo)分为B1(CD19+CD5+)和B2(CD19+CD5-)两个亚群。第二十页,共四十三页。NK细胞表面至少存在CD2、CD16、CD56、CD69、CD94、CD96、CD158a、CD159a、CD161和CD244等多种抗原。目前多以CD3-、CD16+、CD56+作为(zuòwéi)NK细胞的典型标志。第二十一页,共四十三页。第三节抗原(kàngyuán)提呈细胞的表面标志第二十二页,共四十三页。单核-吞噬细胞的典型(diǎnxíng)的表面标志是CD14。人成熟DC的主要特征表面标志为CD1a、CD11c和CD83,但不表达单核-吞噬细胞、T细胞、B细胞和NK细胞的典型的表面标志。第二十三页,共四十三页。第四节淋巴细胞的功能(gōngnéng)检测第二十四页,共四十三页。原理(yuánlǐ):淋巴细胞DNA合成(héchéng)分化(fēnhuà)母细胞刺...