CELLENGINEERING细胞工程第一页,共四十一页。第一页,共四十一页。第一章绪论4个学时第二章实验室配置(pèizhì)及基本技术2个学时第三章植物细胞工程的理论基础4个学时第四章植物组织器官培养技术6个学时第五章植物细胞培养及次生代谢产物生产3个学时第六章原生质体培养和体细胞杂交3个学时第七章人工种子及植物种质资源保存2个学时第八章胚胎干细胞培养2个学时第九章动物细胞培养4个学时第十章动物细胞融合与单克隆抗体4个学时第十一章动物组织与胚胎工程1个学时第十二章试管动物与克隆动物1个学时课程初步安排(ānpái):36学时第二页,共四十一页。第二页,共四十一页。第八章动物(dòngwù)细胞培养第一节动物细胞体外培养方法第二节体外培养动物细胞的生物学特性第三节培养细胞常规检查和特性鉴定(jiàndìng)第四节动物细胞的低温保存第五节细胞同步化第六节器官培养(自学)第三页,共四十一页。第三页,共四十一页。第三节培养(péiyǎng)细胞常规检查和特性鉴定一、培养细胞常规检查(一)肉眼观察培养物颜色及混浊度(二)倒置显微镜观察细胞生长状态(三)培养细胞的污染检测(jiǎncè)和排除二、细胞系的鉴定第四页,共四十一页。第四页,共四十一页。第五页,共四十一页。第五页,共四十一页。(三)培养细胞的污染(wūrǎn)检测和排除培养细胞的污染:混入培养环境中对细胞生长有害的成分和造成细胞不纯的异物,包括:-微生物(真菌、细菌、病毒和支原体)-化学物质(影响细胞生存(shēngcún)非细胞所需的化学成分)-细胞(非同一种的其他细胞)第六页,共四十一页。第六页,共四十一页。常见微生物污染。微生物污染包括细菌、酵母菌、霉菌和病毒污染。无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞(xìbāo)等是主要污染源。严格之无菌操作技术、清洁的环境以及品质良好之细胞来源和培养基严格无菌配制是减低污染之最好方法。第七页,共四十一页。第七页,共四十一页。1、微生物污染(wūrǎn)及其排除微生物污染的途径微生物污染对细胞(xìbāo)的影响微生物污染的检测微生物污染的防治第八页,共四十一页。第八页,共四十一页。a.空气:空气流动性大,如隔离不严,易造成不洁空气的污染。第九页,共四十一页。第九页,共四十一页。由于体外培养细胞自身没有抵抗污染的能力,而且培养基中加入的抗菌素的抗污染能力也有限,因而培养细胞一旦发生污染多数将无法挽救。第十页,共四十一页。第十页,...