流式细胞术在科研(kēyán)中的应用第一页，共五十五页。什么(shénme)是流式细胞仪●流式细胞仪实物(shíwù)BDFACSVantageBD-Calibur第二页，共五十五页。流式细胞(xìbāo)仪可检测到的细胞(xìbāo)参数非荧光非荧光(yíngguāng)(yíngguāng)信号信号颗粒(kēlì)度细胞大小=前向角散射光（FSC）细胞相对大小及其表面积=侧向角散射光（SSC）细胞颗粒度及细胞内细胞器的相对复杂性第三页，共五十五页。外周全(zhōuquán)血细胞散射光双参数点图第四页，共五十五页。荧光(yíngguāng)信号荧光强度（荧光强度（FLFL）：细胞上的荧光染料被激光激发后发射出的荧光，不同的）：细胞上的荧光染料被激光激发后发射出的荧光，不同的荧光染料其发射波长荧光染料其发射波长(bōcháng)(bōcháng)不同。不同。有荧光标记的细胞与无荧光标记的区分开来（阴阳）有荧光标记的细胞与无荧光标记的区分开来（阴阳）高高FLFL细胞与低细胞与低FLFL细胞区分开来（强弱）细胞区分开来（强弱）一般的流式细胞仪只装有一个激光光源（一般的流式细胞仪只装有一个激光光源（488nm488nm），可测出三个），可测出三个FLFL，即，即FL1FL1、、FL2FL2、、FL3FL3，大型的流式细胞仪装有两个或三个激，大型的流式细胞仪装有两个或三个激光光源（光光源（488nm488nm、、633nm633nm和和325nm325nm），可测出），可测出66个个FLFL。。第五页，共五十五页。荧光(yíngguāng)信号双色直接(zhíjiē)染色第六页，共五十五页。流式报告的图一般分为四种，即散点图、直方图、密度图和二维等高图等。最常用的为散点图和直方图。几个概念：%Gated：阳性细胞百分比。反映细胞群体中阳性细胞的数量。Mean：平均荧光强度，与被检测物质(wùzhì)的表达量有关，在正态分布时一般用该值。GeoMean：几何平均荧光强度，在阳性细胞为偏态分布时一般用该值。第七页，共五十五页。散点图密度(mìdù)图二维等高图直方图图报告(bàogào)中常见的几种流式细胞图第八页，共五十五页。图AnnexinV/PI双标记(biāojì)分析细胞凋亡和坏死第九页，共五十五页。流式细胞仪数据分析点图分析(fēnxī)第十页，共五十五页。流式细胞仪数据分析直方图分析(fēnxī)第十一页，共五十五页。图中100～101（M1）为阴性(yīnxìng)细胞，101以上的（M2）为阳性细胞第十二页，共五十五页。当前(dāngqián)流式细胞分析发展趋势从相对(xiāngduì)细胞计数到绝对细胞计数从相对定...
