植物植物(zhíwù)(zhíwù)细胞培养技术的概细胞培养技术的概念念植物细胞培养：是指从植物体中获植物细胞培养：是指从植物体中获得植物细胞，然后在一定的条件下培养，以得植物细胞，然后在一定的条件下培养，以获得所需的细胞或各种产物获得所需的细胞或各种产物(chǎnwù)(chǎnwù)的技术过程。的技术过程。第一页，共三十二页。植物细胞培养技术的理论(lǐlùn)基础植物细胞的全能性：植物的每个细胞都包含着该物种的全部(quánbù)遗传信息，从而具备发育成完整植株的遗传能力。细胞分化：细胞在生长发育的过程中，在形态、结构、生理功能等方面发生某些特异性差异的过程。脱分化：在某些特定条件下，分化细胞的基因活动模式会发生可逆的变化，重新回到未分化状态，这个过程成为脱分化。第二页，共三十二页。植物(zhíwù)单细胞的获取一、从外植体直接分离细胞(xìbāo)（一）、机械捣碎法先将叶片等外植体轻轻捣碎，然后通过过滤和离心分离细胞。第三页，共三十二页。优点：1、获得的植物细胞没有经过酶的作用，不会受伤害。2、不需要经过质壁分离，有利于进行生理生化研究。缺点：由于受到机械作用，细胞结构会受到一定的伤害，获得完整(wánzhěng)的细胞团或细胞数量少。第四页，共三十二页。（二）、酶解法利用果胶酶、纤维素酶等处理，分离(fēnlí)出具有代谢活性的细胞。该法不仅能降解中胶层，还能软化细胞壁。所以，用该法分离(fēnlí)细胞时，对细胞给予渗透压保护，如添加适量甘露醇。第五页，共三十二页。二、通过愈伤组织诱导(yòudǎo)获取植物细胞（一）、概念愈伤组织(zǔzhī)：植物各种器官的外植体在离体的条件下，细胞经过脱分化等一系列过程，重新转化为未分化细胞，继而形成一种能快速增殖的无特定结构和功能的薄壁细胞团，称为愈伤组织(zǔzhī)。第六页，共三十二页。（二）、影响(yǐngxiǎng)愈伤组织诱导的因素•1、要有合适的外植体。一般来说，外植体细胞分化(fēnhuà)程度越高，脱分化(fēnhuà)越困难，所需时间越长•2、要有适宜的培养基和培养条件。植物激素的种类和浓度最为重要。•3、光照和温度也影响愈伤组织的发生。•4、NH4+/NO3-的浓度比对愈伤组织的诱导也有影响。浓度比为4:1时，诱导率最高。第七页，共三十二页。（三）、从愈伤组织分离(fēnlí)得到植物细胞诱导获得的愈伤组织可以用小刀或镊子(nièzi)分割得到植物小细胞团，也可以将愈伤组织转移到液体培养基中，加入杀菌的玻璃珠，振荡...
