临床药理研究所临床药理研究所1第一页，共一百二十八页。现代生物(shēngwù)技术基因工程(jīyīngōngchéng)技术细胞工程技术(jìshù)酶工程技术发酵工程技术细胞培养细胞培养2第二页，共一百二十八页。细胞分离(fēnlí)技术从血液、体液中分离(fēnlí)细胞从原代组织中分离细胞从原培养容器中分离细胞--传代培养原代培养(péiyǎng)3第三页，共一百二十八页。细胞分离技术--从血液(xuèyè)、体液中分离细胞采血方法：人静脉穿刺、耳垂或手指针刺采血；小动物（大鼠、小鼠）剪尾法、眼眶采血、心脏(xīnzàng)穿刺法、断颈取血或股动脉放血。兔耳静脉或动脉穿刺取血。4第四页，共一百二十八页。细胞(xìbāo)分离技术--从血液、体液中分离细胞血液抗凝方法：肝素(ānsù)ɡ法：按每ml血液约用0.1-0.2mg肝素（即5%肝素溶液2-4µl）；草酸盐法：取草酸钾0.2g，草酸铵0.3g，加双蒸水10ml溶解后，取0.2ml放入5ml的试管中，使其干燥。若采用5ml以下的血液可直接注入此试管中，轻轻摇晃；枸橼酸钠法：先配制2%枸橼酸钠，取0.15-0.2ml加于1ml血液中即可抗凝；EDTA法（186.1）：每ml血液中加0.5mmol/LEDTA2µl。5第五页，共一百二十八页。细胞(xìbāo)分离技术--从血液、体液中分离细胞体液标本采集：在局部70%酒精消毒灭菌后，用灭菌注射器穿刺入体腔（如胸腔，腹腔(fùqiāng)，关节腔等）抽取液体样品。膝关节腔穿刺(chuāncì)胸腔穿刺6第六页，共一百二十八页。细胞分离技术(jìshù)--从血液、体液中分离细胞血样中红细胞和白细胞的分离：利用细胞的相对密度(mìdù)或大小不同而沉降速度不同的原理，以自然沉降法结合不同速度的离心沉降法将不同的细胞分离。抗凝血，室温或37℃下直立静置30-60min，红细胞沉降至下层，中间乳白色薄膜层为白细胞及血小板，上层为淡黄色血浆。也可将抗凝血与3%明胶（经灭菌消毒）等量或3︰l量混合于离心管中，直立静置30-60min，红细胞沉于管底，上层乳白色混浊液含白细胞。7第七页，共一百二十八页。细胞分离(fēnlí)技术--从血液、体液中分离细胞血中单个核细胞的分离：单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞，其相对密度(mìdù)在1.050-1.077之间，采用速度沉降法原理使其分离。淋巴细胞分离液8第八页，共一百二十八页。细胞分离技术(jìshù)--从血液、体液中分离细胞血中单核细胞的分离：利用细胞在培养(péiyǎng)过程中贴壁时间的早晚不同进行细胞分离单个核细胞(xìbāo)悬液多将悬...
