大肠埃希氏菌药典法生化检查潘庆玲第一页，共二十七页。大肠埃希菌检查大肠埃希菌〔Escherichiacoil〕即大肠杆菌，为肠杆菌科埃希菌属的模式种。大肠埃希菌是人和温血动物肠道内的栖居菌，随粪便排出体外。在药品中检出大肠埃希菌，说明该样品受到人和温血动物粪便的污染，即可能是污染肠道病原体。大肠埃希菌除普通大肠埃希菌外，还有致病性大肠埃希菌，可引起婴幼儿、成人爆发性腹泻。为了保证人体健康，口服给药制剂必须检查大肠埃希菌。第二页，共二十七页。标准?中国药典?〔2022年版〕二部口服给药制剂细菌总数每1ml不得过100cfu霉菌和酵母菌总数每1ml不得过100cfu大肠埃希菌总数不得检出第三页，共二十七页。备料单〔增菌培养〕序号品名规格数量备注1锥形瓶250ml42刻度吸管10ml23刻度吸管1ml14烧杯250ml15量筒100ml16胆盐乳糖培养基100ml3装锥形瓶7pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液150ml1装锥形瓶灭菌参数：121℃、20min第四页，共二十七页。操作过程样品10ml90ml供试液稀释液阴样阳10ml10ml10ml菌悬液1mlBL培养基BL培养基BL培养基培养温度：36℃培养时间：18~24h〔必要时可延长至48h〕第五页，共二十七页。备料单〔快速生化试验〕序号品名规格数量备注1刻度吸管1ml32试管中43MUG培养基5ml4分装到试管中4靛基质————灭菌参数：115℃、20min第六页，共二十七页。操作过程阴样阳阴样阳本底靛基质试验紫外荧光0.2ml0.2ml0.2ml培养温度：36±1℃培养时间：18~24h第七页，共二十七页。备料单〔别离培养〕序号品名规格数量备注1EMB或麦康凯琼脂培养基60ml1置皿2平皿——3灭菌参数：121℃、15min第八页，共二十七页。操作过程阴样阳EMB或麦康凯琼脂培养基接种环（四区划线法）培养温度：36±1℃培养时间：18~24h第九页，共二十七页。生化试验中MUG在紫外等下显荧光的原理大肠埃希氏菌是指能产生β-半乳糖苷酶分解ONPG使培养液呈黄色，能产生β-葡萄糖醛酸酶分解MUG使培养液在波长366nm紫外光下产生荧光的细菌。第十页，共二十七页。BL培养基配方〔每升〕：胨20.0g提供碳氮源乳糖5.0g可发酵的糖类氯化钠5.0g维持均衡的渗透压磷酸氢二钾4.0g缓冲剂磷酸二氢钾1.3g去氧胆酸钠/牛胆盐0.5g/2.0g选择性抑菌剂第十一页，共二十七页。使用方法1、称取本品35.8g，参加蒸馏水或去离子水1L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，每瓶100mL，121℃灭菌20min，待冷至常温后，备用。2、样品的处理。略。3、取胆盐乳糖增菌液3份，2份...
