乙肝表面抗原及乙肝两对半检测(jiǎncè)ClicktoaddText第一页,共四十页。主要(zhǔyào)内容检测方法及原理胶体金免疫层析(cénxī)ɡ法酶免疫技术免疫定量分析法第二页,共四十页。检测(jiǎncè)的方法及原理第三页,共四十页。检测方法(fāngfǎ)及原理胶体金免疫(miǎnyì)层析法胶体金免疫(miǎnyì)层析法Part1Part1胶体金免疫(miǎnyì)层析法将特异性的抗原或抗体以条带状固定在膜上,胶体金标记试剂(抗体或单克隆抗体)吸附在结合垫上,当待检样本加到试纸条一端的样本垫上后,通过毛细作用向前移动,溶解结合垫上的胶体金标记试剂后相互反应,再移动至固定的抗原或抗体的区域时待检物与金标试剂的结合物又与之发生特异性结合而被截留,聚集在检测带上,可通过肉眼观察到显色结果。第四页,共四十页。检测(jiǎncè)方法及原理胶体金免疫(miǎnyì)层析法胶体金免疫(miǎnyì)层析法Part2Part2酶免疫(miǎnyì)技术以酶标记的抗体(或抗原)作为主要试剂,将抗原抗体的特异性和酶高效催化反应的专一性相结合的一种免疫检测技术。酶结合物既保留抗体(或抗原)的免疫学活性,又保留酶对底物的催化活性。特点:灵敏度高、特异性强、准确性好、试剂稳定、方法简便易行第五页,共四十页。检测(jiǎncè)方法及原理Part2Part2两对半ELISA检测(jiǎncè)原理ELISA是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中,通过不同的设计,具体的方法步骤可有多种。即:用于检测抗体的间接法、用于检测抗原的双抗体夹心法以及用于检测小分子(fēnzǐ)抗原或半抗原的抗原竞争法等等。比较常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法。第六页,共四十页。检测方法(fāngfǎ)及原理Part2Part2两对半ELISA检测(jiǎncè)原理1HBsAg:双抗体夹心法——正比(zhèngbǐ)单克隆HBsAb-HBsAg-多克隆HBsAb-HRP2HBsAb:双抗原夹心法——正比HBsAg-HBsAb-HBsAg-HRP第七页,共四十页。检测(jiǎncè)原理Part2Part2两对半ELISA检测(jiǎncè)原理3HBeAg:双抗体夹心法——正比单克隆HBeAb-HBeAg-多克隆HBeAb-HRP4HBeAb:竞争(jìngzhēng)抑制法——反比多克隆HBeAb-HBeAg-HBeAb-HRP/HBeAb(标本)5HBcAb:竞...