刘婷婷等/黑龙江林蛙热休克蛋白hsp70家族基因的鉴定及其在感染下的表达分析ChineseJournalofBiotechnologyhttp://journals.im.ac.cn/cjbcnApr.25,2023,39(4):1710-1730DOI:10.13345/j.cjb.220641©2023ChinJBiotech,Allrightsreserved资助项目：黑龙江省自然科学基金(LH2021C053)ThisworkwassupportedbytheNaturalScienceFoundationofHeilongjiangProvince(LH2021C053).*Correspondingauthors.LIUYufen,Tel:+86-451-88060784,E-mail:liuyufen@hrbnu.edu.cn;LIUPeng,Tel:+86-451-88060784,E-mail:liupeng111111@163.comReceived:2022-08-14;Accepted:2022-11-10;Publishedonline:2022-11-141710生物工程学报黑龙江林蛙热休克蛋白hsp70家族基因的鉴定及其在感染下的表达分析刘婷婷，郭晶晶，陈兆东，刘玉芬*，井乐刚，刘鹏*，赵文阁哈尔滨师范大学生命科学与技术学院，黑龙江哈尔滨150025刘婷婷,郭晶晶,陈兆东,刘玉芬,井乐刚,刘鹏,赵文阁.黑龙江林蛙热休克蛋白hsp70家族基因的鉴定及其在感染下的表达分析[J].生物工程学报,2023,39(4):1710-1730.LIUTingting,GUOJingjing,CHENZhaodong,LIUYufen,JINGLegang,LIUPeng,ZHAOWenge.Identificationofheatshockproteinhsp70familygenesfromRanaamurensisanditsexpressionprofilesuponinfection[J].ChineseJournalofBiotechnology,2023,39(4):1710-1730.摘要：热休克蛋白(heatshockprotein,HSPs)是一类广泛存在于各类生物体中高度保守的应激蛋白，当生物体受到环境中物理、化学和生物等因素的刺激时，机体出于自我保护会迅速产生应激反应，合成该类蛋白，从而减少外界刺激对机体的损伤，提高自身抵抗能力，HSP70是该家族的重要成员。为探究HSP70在两栖类抗感染中的作用，以黑龙江林蛙(Ranaamurensis)作为研究对象，基于同源克隆的方法，采用反转录PCR(reversetranscriptionPCR,RT-PCR)技术克隆Ra-hsp70家族基因；采用生物信息学方法对Ra-hsp70家族基因进行序列特征、立体结构、亲缘关系的分析；再利用实时荧光定量PCR(real-timequantitativePCR,qRT-PCR)技术对Ra-hsp70家族基因在细菌感染下的表达谱进行分析；应用免疫组织化学技术对HSP70蛋白进行表达和定位分析。结果表明，获得的Ra-HSP70家族的4个成员HSP70、HSPA5、HSPA8和HSPA13均包含有3段保守的HSP70家族标签序列，属于典型的HSP70家族成员；4个成员在系统发育树中分布在4个不同的分支，且含有相同亚细胞定位基序的成员分布在同一分支；感染嗜水气单胞...
