海南大学环境与植物保护学院苏增建环境(huánjìng)毒理学实验授课教师：苏增建第一页，共二十四页。海南大学环境与植物保护学院苏增建实验(shíyàn)一蚯蚓急性毒性实验(shíyàn)一、目的与要求（1）学习和掌握滤纸接触毒性(dúxìnɡ)实验和人工土壤实验的基本原理和方法。（2）初步了解评价环境中化学物质对土壤中动物急生伤害的标准和基本步骤。第二页，共二十四页。海南大学环境与植物保护学院苏增建二、原理滤纸接触法毒性实验简单易行，可对受试物毒性进行初筛。将蚯蚓与湿润(shīrùn)的滤纸上的受试物接触，测定土壤中受试物对蚯蚓的潜在影响。人工土壤实验系统将蚯蚓置于含不同浓度受试物的人工土壤中，饲养7d和14d，评价其死亡率，评价受试物对蚯蚓的急性毒性作用。实验(shíyàn)一蚯蚓急性毒性实验(shíyàn)第三页，共二十四页。海南大学环境与植物保护学院苏增建实验(shíyàn)一蚯蚓急性毒性实验(shíyàn)三、设备与材料1、主要仪器和设备玻璃容器：平底玻璃管（3cm×8cm）培养装置：光强400-800lx的温控培养箱中性(zhōngxìng)滤纸：80-85g/m2移液器、塑料薄膜、烘箱、电吹风第四页，共二十四页。海南大学环境与植物保护学院苏增建实验(shíyàn)一蚯蚓急性毒性实验(shíyàn)2、试验生物选用二月龄以上，体重300-500mg左右的健康赤子爱胜蚓。实验前应在实验室条件(tiáojiàn)下驯养2周以上。第五页，共二十四页。海南大学环境与植物保护学院苏增建实验(shíyàn)一蚯蚓急性毒性实验(shíyàn)3、人工土壤人工土壤基质组成(zǔchénɡ)（干重）：（1）10%干牛粪（PH为5.5-6.0，磨细，风干，测定含水量）；（2）20%高岭黏土（含50%以上高岭土）；（3）70%石英沙（粒径的石颗粒50%以上）；（4）混合人工土壤的组成成分，加入蒸馏水使其含水量为干重的25%-42%，混合均匀。第六页，共二十四页。海南大学环境与植物保护学院苏增建实验(shíyàn)一蚯蚓急性毒性实验(shíyàn)四、方法和步骤1、清肠用蒸馏水清洗蚯蚓，然后置于铺有滤纸的磁盘上清肠24h，用去离子水冲洗(chōngxǐ)后，滤纸吸干称重，供试。注：清肠过程用薄膜包紧磁盘，防止蚯蚓爬出磁盘死亡。第七页，共二十四页。海南大学环境与植物保护学院苏增建实验(shíyàn)一蚯蚓急性毒性实验(shíyàn)2、滤纸实验在平底试管内壁衬滤纸，铺满不重叠；设5个浓度梯度（见附表）及对照共6组试管，每组≥10个重复，每个试管内首先移取1ml对应浓度的受试物溶液，用洁净空气吹干...
