第三章免疫细胞(xìbāo)的分离及其表面标志检测技术第一页，共四十一页。第一节免疫细胞(xìbāo)的分离一、外周血单个核细胞分离二、淋巴细胞的分离三、T细胞和B细胞的分离四、T细胞亚群的分离第二页，共四十一页。第二节淋巴细胞标志及亚群分类一、Ｔ细胞表面(biǎomiàn)标志及亚群二、B细胞表面标志三、NK细胞表面标志第三节其他的免疫细胞第四节免疫细胞表面标志的检测及应用一、免疫细胞表面标志的检测方法二、淋巴细胞表面标志检测的临床意义思考题小结(xiǎojié)第三页，共四十一页。第四页，共四十一页。(xìbāo)外周血单个核细胞(xìbāo)分离淋巴细胞的分离T细胞和B细胞的分离T细胞亚群的分离第五页，共四十一页。(xìbāo)外周血单个核细胞(xìbāo)（peripheralmononuclearcells,PMNC）包括淋巴细胞和单核细胞（monocyte）。Ficoll分离液法主要用于分离外周血中的单个核细胞，是一种单次差速密度梯度离心的分离法。第六页，共四十一页。(xìbāo)分离基本原不同细胞密度(mìdù)不同不同细胞表面生物学特性不同不同细胞表面分化抗原不同第七页，共四十一页。(bùtón)ɡ(bùtón)ɡ人的红细胞密度(mìdù)为1.093粒细胞密度为1.092单个核细胞（淋巴细胞和单核细胞）的密度为第八页，共四十一页。不同细胞(xìbāo)密度不同第九页，共四十一页。用1.077±0.001的分层液可将细胞(xìbāo)分离第十页，共四十一页。密度梯度离心(líxīn)(Ficoll)离心第十一页，共四十一页。(fēnlí)贴壁粘附法吸附柱过滤法磁铁吸引法Percoll分离液法（连续(liánxù)密度梯度离心）（去单核细胞）第十二页，共四十一页。E花环沉降(chénjiàng)法尼龙毛柱分离法三、T(xìbāo)细胞的分离第十三页，共四十一页。(xìbāo)群的分亲和板结合分离法磁性(cíxìng)微球分离法荧光激活细胞分离仪分离法第十四页，共四十一页。荧光激活(jīhuó)细胞分离仪分离法第十五页，共四十一页。第十六页，共四十一页。磁珠大小可以(kěyǐ)选择第十七页，共四十一页。大小免疫磁珠分离细胞(xìbāo)的特点比较比较项目大磁珠小磁珠对细胞的影响对细胞造成机械压力，影响其生物学活性，不利于分离后培养。对细胞温和，不影响分离细胞的后续培养。对流式细胞仪的影响阻塞流式细胞仪的喷嘴，影响散射光。可直接上流式细胞仪检测，不影响散射光。分离条件要求技术简单，分离可在试管中完成。需要很强的磁场来分离细胞。收率...
