免疫组化、免疫荧光、免疫组化、免疫荧光、流式细胞术的应用流式细胞术的应用(yìngyòng)(yìngyòng)比较比较及常见问题分析及常见问题分析宋砚明宋砚明第一页,共三十五页。第一页,共三十五页。免疫组化(IHC)的应用介绍(jièshào)免疫荧光(IF)的应用介绍流式细胞术(FC)的应用介绍IHC、IF、FC区别与联系第二页,共三十五页。第二页,共三十五页。免疫组织化学原理及特点免疫组织化学原理及特点利用抗原与抗体的特异性结合原理和特殊的标记技术,通过化学反应使标记抗体显色,对利用抗原与抗体的特异性结合原理和特殊的标记技术,通过化学反应使标记抗体显色,对组织细胞内的特异性抗原进行组织细胞内的特异性抗原进行定位、定性、定量定位、定性、定量检测检测(jiǎncè)(jiǎncè)的一门技术。的一门技术。免疫组化具有操作简单,特异性强,敏感性高,定位准确,形态与功能相结合免疫组化具有操作简单,特异性强,敏感性高,定位准确,形态与功能相结合等特点。等特点。免疫免疫(miǎnyì)(miǎnyì)组织化学组织化学((Immunohistochemistry,IHCImmunohistochemistry,IHC))第三页,共三十五页。第三页,共三十五页。细细胞胞抗原抗原(kàngyu(kàngyuán)án)一一抗抗二二抗抗辣根过氧化物辣根过氧化物(uòyǎnhuàwù)ɡɡ(uòyǎnhuàwù)ɡɡ酶(酶(HRPHRP))33,,3-3-二氨联苯胺(二氨联苯胺(DABDAB)显色)显色剂剂棕褐色棕褐色(hèsè)(hèsè)络合物络合物IHCIHC反应原理示意图反应原理示意图第四页,共三十五页。第四页,共三十五页。组织切片组织切片//芯片芯片(xīnpiàn)(xīnpiàn)制作制作第五页,共三十五页。第五页,共三十五页。2.2.组织芯片应用领域组织芯片应用领域组织芯片的应用组织芯片的应用(yìngyòng)(yìngyòng)领域包括与生命科学相关的基础研究、临床研究、应用领域包括与生命科学相关的基础研究、临床研究、应用(y(yìngyòng)ìngyòng)研究和新药开发等。研究和新药开发等。免疫组化染色免疫组化染色((IHCIHC));;原位杂交原位杂交((ISHISH););荧光原位杂交荧光原位杂交((FISHFISH););原位末端标记分析原位末端标记分析((TUNELTUNEL););原位原位PCRPCR以及激光捕获显微分离系统辅助的以及激光捕获显微分离系统辅助的cDNAcDNA杂交。杂交。1.1.组织芯片组织芯片组织芯片(或组织微阵列)是将数十个甚至上千个不同个体的组织标本集成在一张固相载...