染色质免疫沉淀Chromatinimmunoprecipitation第一页，共三十一页。第一页，共三十一页。基因型决定(juédìng)表型第二页，共三十一页。第二页，共三十一页。破坏(pòhuài)了基因型也就改变了表型第三页，共三十一页。第三页，共三十一页。但是，也有一些(yīxiē)无法解释的现象在相应的基因碱基序列没有发生变化的情况(qíngkuàng)下，一些生物体的表型却发生了改变。第四页，共三十一页。第四页，共三十一页。什么(shénme)是表观遗传学?是DNA及其染色质环境的稳定改变，这些可遗传的变化(biànhuà)并不涉及DNA序列的突变。第五页，共三十一页。第五页，共三十一页。表观(biǎoɡuān)遗传修饰在不影响DNA序列的情况下改变基因组的修饰，不仅可以影响个体的发育，而且还可以遗传下去。这类变异被称为“表观遗传修饰”，并被认为是导致(dǎozhì)遗传物质一致的孪生子出现个体差异的主要原因。第六页，共三十一页。第六页，共三十一页。染色质重塑•染色质重塑在广义上是指染色质结构的动态调整或重新塑造染色质结构。在一些核内因子作用下，染色质DNA与其包绕的核心组蛋白之间亲和力的变化或相对位置的改变使得染色质结构变得较为松散，DNA更易于暴露。染色质重塑就是通过这样的变化来调控基因的转录。•在狭义上，染色质重塑专指由ATP提供能量的、通过依赖于ATP的染色质重塑复合物改变组蛋白与DNA的结合(jiéhé)状态，在靠近核心组蛋白的DNA表面建立特殊的构象，使转录因子较易于接近DNA的过程。第七页，共三十一页。第七页，共三十一页。染色质免疫沉淀技术(jìshù)的发展使染色质重塑研究得以进步第八页，共三十一页。第八页，共三十一页。实验(shíyàn)目的学习掌握(zhǎngwò)染色质免疫沉淀技术的基本原理与关键的操作步骤。第九页，共三十一页。第九页，共三十一页。实验(shíyàn)原理第十页，共三十一页。第十页，共三十一页。实验(shíyàn)流程一、交联及染色质DNA剪切条件的优化1.准备(zhǔnbèi)一瓶接近长满的HeLa细胞，向培养液中加入37%的甲醛至终浓度为1%，轻轻摇匀，在37℃孵育10分钟。①甲醛的作用②细胞的用量③交联条件对实验结果的影响2.弃培养液，用预冷至4℃带蛋白酶抑制剂PMSF的1×PBS洗细胞两次，刮细胞到一个2ml离心管，2000rpm，4℃离心4min收集细胞。第十一页，共三十一页。第十一页，共三十一页。甲醛的作用在各种交联试剂中，甲醛（HCHO）的应用最为广泛。甲醛的浓度、作用时间及交联的温度等均可能影响交...
