第四章动物细胞与组织培养(AnimalCellandTissueCulture)动物体内取出组织和细胞,在体外模拟机体内的生理条件,建立无菌、适温和一定的营养条件,使之生长和生存,并维持其结构和功能的技术,称动物细胞与组织培养。是动物细胞工程的重要技术根底:细胞融合、组织工程、胚胎工程、干细胞工程、动物克隆、动物细胞产品的大规模制备技术等等都离不开~。第一页,共一百一十二页。4.1概述4.1.1开展历史4.1.2动物细胞的特点4.1.3动物细胞与组织培养的概念4.1.4动物细胞的体外培养生长特性第二页,共一百一十二页。4.1.1开展历史1、动物细胞〔组织〕培养技术的起源:19世纪所应用的胚胎学技术。动物细胞培养的奠基人:美国生物学家哈里森〔1907年〕用盖玻片覆盖凹窝玻璃悬滴培养法将蛙胚神经组织培养在淋巴液中,存活几周,有细胞突起的生长过程。先驱者中法国学者卡勒尔:设计卡氏培养瓶自1923年用于培养鸡胚的心肌组织成功以后,已使多种动物组织培养获得成功。第三页,共一百一十二页。4.1.1开展历史2、20世纪40年代以后:动物组织培养的科学家们研究重点集中在培养基方面。3、20世纪80年代以后:随着基因工程技术和细胞融合技术的迅速发展,已能把特定的外源基因通过PCR技术扩增几千倍,并可转染到细胞内,使其得到高质量的表达。第四页,共一百一十二页。4.1.1开展历史4、近年:淋巴细胞杂交瘤技术,使动物细胞培养进入了一个新领域。杂交瘤细胞能在体外悬浮情况下大量繁殖并产生单克隆抗体。随着基因重组和单克隆抗体技术的开展,动物细胞组织培养展现出越来越可观的工业化前景。第五页,共一百一十二页。4.1.2动物细胞的特点〔一〕动物细胞之间的连接特点:1.紧密连接:牢固、无间隙。2.间隙连接:2-3nm间隙。3.隔壁连接:20-30nm间隔,有横隔。4.中间连接:无横隔、透明,间隔20-30nm。5.桥粒连接:有间隙,有纤维形成的特殊结构。第六页,共一百一十二页。4.1.2动物细胞的特点〔二〕动物细胞的培养特点:1.动物细胞比微生物细胞大,无细胞壁。2.动物细胞倍增时间长,生长缓慢,易受污染。3.培养过程需氧量少,对机械搅拌或剪切力敏感。4.动物细胞间主要以聚集体形式存在。5.原代细胞一般繁殖50代左右即退化死亡。第七页,共一百一十二页。4.1.3动物细胞与组织培养的概念动物细胞与组织培养:从动物体内取出细胞或组织,模拟体内的生理环境条件,在无菌、适宜温度和丰富营养条件下,使离体细胞或组织生存、生长并维...