第一页,共五十一页。家蚕能够吐出蚕丝为人类利用。但繁殖慢,产量低。大肠杆菌繁殖很快,但不会产丝。第二页,共五十一页。•用人工方法,把甲生物的某个基因提取出来,在体外进行切割、拼接和重组,然后将其导入乙生物的细胞内进行大量复制,并进行表达,从而定向地改变乙生物的遗传性状,或获得人类所需要的基因产物〔蛋白质、多肽、酶〕。剪切拼接导入甲生物取出所需基因生物新类型表达乙生物第三页,共五十一页。基因的大小以纳米计算,要对它进行剪切、拼接等操作,没有非常精细的工具是不行的。进行基因操作最少需要以下三种工具:第四页,共五十一页。主要在中。已发现数千种──限制性核酸内切酶第五页,共五十一页。例如:大肠杆菌的一种限制酶能识别序列,并在之间切开。限制酶第六页,共五十一页。GAATTCCTTAAG5′5′3′3′粘性末端粘性末端限制性内切酶CTTAAG5′3′AATTCG3′5′第七页,共五十一页。TGCAACGT5′3′3′5′ACGT5′3′GCAT3′5′另一种限制酶第八页,共五十一页。作用:将粘性末端碱基互补的两个DNA片段连接起来,使之成为一个完整的DNA分子〔使两个DNA片段通过磷酸二酯键连接成一个DNA分子〕。──DNA连接酶第九页,共五十一页。CTTAAGAATTCG连接酶第十页,共五十一页。•能够在宿主细胞中复制并稳定地保存。•具有多个限制酶切点〔每种限制酶切点只有一个〕,以便与外源基因连接。•具有标记基因,便于进行筛选。──载体要把甲生物取出的基因送到乙生物的细胞中去,需要运输基因的载体。第十一页,共五十一页。最常用的基因载体是细菌细胞质的(核区)质粒(细胞质DNA)大肠杆菌第十二页,共五十一页。最常用的基因载体是细菌细胞质的(核区)质粒(细胞质DNA)大肠杆菌无影响只能第十三页,共五十一页。抗生素抗性基因(标记基因)(细胞质DNA)(核区)质粒(细胞质DNA)大肠杆菌控制质粒DNA转移的基因第十四页,共五十一页。4、筛选含有目的基因的受体细胞1、获得目的基因2、形成重组DNA分子3、将重组DNA分子导入受体细胞5、目的基因的表达第十五页,共五十一页。①逆转录法:信使RNA逆转录酶DNA单链合成DNA双链(基因)②直接合成法:组成蛋白质的氨基酸序列推测信使RNA核苷酸序列推测基因单核苷酸序列合成基因双链第十六页,共五十一页。人工合成(基因比较小)DNA合成仪第十七页,共五十一页。第十八页,共五十一页。1234522557294时间(min)温度(℃)PCR反响适温延伸3高温变性1低温退火2重复1~3步25~30轮目的DNA...