第38卷第4期2022年11月广东农工商职业技术学院学报JournalofGuangdongAgricultureIndustryBusinessPolytechnicVol.38No.4Nov.2022聚已亚甲基盐酸对重组蛋白A溶液的抑菌作用研究张海珍,杨文俊,杨正根(广州康盛生物科技股份有限公司,广东广州,510660)摘要:本文选取大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌、黑曲霉5种菌种为指示菌,测定重组蛋白A溶液中抑菌剂聚已亚甲基盐酸(PHMB)的抑菌活性,并测定抑菌剂对蛋白活性的影响。结果表明,PHMB的最低有效浓度为1.5g/L,加入适宜的抑菌剂对蛋白浓度和蛋白活性没有影响,蛋白可以室温储存12个月以上,可以作为蛋白溶液的储存液。关键词:聚已亚甲基盐酸;抑菌剂;蛋白中图分类号:Q93文献标识码:A文章编号:1009-931X(2022)04-0026-04收稿日期:2022-10-21作者简介:张海珍(1985—),女,山西运城人,硕士,工程师。研究方向:重组蛋白表达,纯化及吸附产品。通讯作者:杨正根(1982—),男,江西宜春人,硕士,工程师。研究方向:生物医用材料与血液净化产品。金黄色葡萄球菌蛋白A能与人类及多种哺乳动物血清中免疫球蛋白分子的Fc段特异性结合,在抗体纯化用亲和层析介质[1,2]及医学领域均有广泛的应用[1]。为防止蛋白A溶液在冷藏或常温储存过程中可能发生的微生物污染、延长保存时间,需要在保存液中加入抑菌剂。聚已亚甲基盐酸(PHMB)是目前公认的较安全的抑菌剂[3],对细菌和真菌的杀灭效果均较好[4-5],被广泛用于新型抑菌材料的研发[6-8]。本文对PHMB不同浓度及不同时间处理后,重组蛋白A溶液中的菌数下降情况进行比较研究,以期为同类重组蛋白制品中抑菌剂的选择提供参考。一、材料与方法(一)材料与仪器大肠埃希菌(Escherichiacoli)〔CMCC(B)44102〕、金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)〔CMCC(B)26003〕、铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)〔CMCC(B)10104〕、白色念珠菌(Candidaalbicans)〔CMCC(F)98001〕及黑曲霉(Aspergillusniger)〔CMCC(F)98003〕均为购买自中国药品生物制品检定所的标准菌株,菌数传代为第二代。胰蛋白胨大豆肉汤(琼脂)培养基、沙氏葡萄糖(琼脂)培养基、氯化钠-蛋白胨缓冲液为广东环凯微生物科技有限公司生产。PHMB(20%)购自广州市拓瑞化工科技有限[应用研究]公司;BCA试剂盒购自Thermo公司;琼脂糖购自GE公司;高碘酸钠购自天津福晨化学试剂厂;重组蛋白A溶液、人IgG溶液、PBS溶液、洗脱溶液由本实验室制...