22现代检验医学杂志第38卷第1期2023年1月JModLabMed,Vol.38,No.1,Jan.2023结直肠癌患者血清外泌体与组织中KRAS，BRAF，NRAS和PIK3CA基因突变检测及临床意义的比较靳杨1，姜利琼2，房烨1，曾燕兰1，何毅1，边革元1(1.中国人民解放军联勤保障部队第九二〇医院重症医学科,昆明650032；2.云南省阜外心血管病医院健康管理中心，昆明650102)摘要：目的检测结直肠癌(colorectalcancer,CRC)患者血清外泌体KRAS，BRAF，NRAS和PIK3CA相关基因位点的突变，分析其与癌组织基因突变的一致性及其可能的影响因素。方法2019年2月～2021年1月中国人民解放军联勤保障部队第九二〇医院100例结直肠癌患者作为研究对象。提取患者血清外泌体，并用蛋白免疫印迹（Westernblot，WB）法检测外泌体标志物CD63和TSG101的蛋白表达；聚合酶链式反应（polymerasechainreaction，PCR）检测血清外泌体及手术切除的癌组织中KRAS，BRAF，NRAS和PIK3CA基因突变情况，Kappa一致性检验分析血清外泌体突变与组织突变的一致性，Logistic单因素回归分析影响一致性的因素。结果癌症基因组图谱（thecancergenomeatlas，TCGA）数据显示，KRAS，BRAF，NRAS和PIK3CA的结直肠癌突变率分别为35%～96%，5%～15%，5%～30%和18%～36%，且KRAS和BRAF的突变与结直肠癌患者的低存活率有关。血清外泌体中KRAS，BRAF，NRAS和PIK3CA的突变率分别为94.00%，11.00%，17.00%和35.00%；结直肠癌组织KRAS，BRAF，NRAS和PIK3CA的突变率分别为34.00%，5.00%，6.00%和16.00%；血清外泌体中KRAS，BRAF，NRAS和PIK3CA的突变率均高于组织，差异有统计学意义（χ2=101.027～256.250，均P＜0.05）。血清外泌体与组织中KRAS突变的一致率为40.00%（Kappa值=0.064，P>0.05），BRAF突变的一致率为99.00%（Kappa值=0.599，P<0.05），NRAS突变的一致率为89.00%（Kappa值=0.475，P<0.05），KRAS突变的一致率为81.00%（Kappa值=0.523，P<0.05）。ECOG评分、转移、临床分期是影响外泌体和组织KRAS，BRAF，NRAS和PIK3CA的突变检测一致性的因素。结论结直肠癌患者血清外泌体KRAS，BRAF，NRAS和PIK3CA的突变率高于组织，二者BRAF，NRAS和PIK3CA的一致性中等，为外泌体的基因检测指导临床靶向治疗提供参考。关键词：结直肠癌；血清外泌体；基因突变中图分类号：R735.3；R730.43文献标识码：A文章编号:1671-7414（2023）01-022-05doi:10.3969/j.issn.1671-7414.2023.01.005ComparisonofKRAS,BRAF,NRASandPIK3CAGeneMutationsinSerumExoso...
