第57卷第2期华中师范大学学报(自然科学版)Vol.57No.22023年4月JOURNALOFCENTRALCHINANORMALUNIVERSITY(Nat.Sci.)Apr.2023收稿日期:2022-03-07.基金项目:江苏省高等学校自然科学研究重大项目(20KJA310006);江苏省博士后科研资助计划项目(2021K209B).*通信联系人.E-mail:zhangyingzj85@163.com;huxinx@ujs.edu.cn.DOI:10.19603/j.cnki.1000-1190.2023.02.010文章编号:1000-1190(2023)02-0255-07fruA基因对伤寒沙门菌侵袭力和生物膜形成的影响党娟娟,唐浩,靳梦彤,占子阳,汤新逸,张盈*,黄新祥*(江苏大学医学院,江苏镇江212013)摘要:为探究fruA对伤寒沙门菌生长、毒力及生物膜形成的影响,利用pBAD33制备fruA的高表达菌株(WT-pfruA)及其空载体对照菌株(WT-pBAD33).通过细菌的生长曲线测定、泳动试验、T84细胞侵袭实验以及96孔微量板结晶紫染色法分别检测fruA对伤寒沙门菌生长、毒力及生物膜形成的影响;同时应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析fruA对伤寒沙门菌毒力及生物膜相关基因的调控作用.结果显示,成功制备了伤寒沙门菌的WT-pfruA及其WT-pBAD33,发现高表达fruA后,伤寒沙门菌的生长无明显变化、运动能力增强、侵袭力上升、生物膜形成能力增加;同样地,与WT-pBAD33相比,WT-pfruA中动力、侵袭及生物膜相关基因的转录水平明显上调.综上,fruA基因可增强伤寒沙门菌的毒力及生物膜形成,并对其相关表型基因起正调控作用.关键词:伤寒沙门菌;fruA;毒力;生物膜中图分类号:R378文献标志码:A开放科学(资源服务)标志码(OSID):伤寒沙门菌(SalmonellaentericaserovarTyphi,S.Typhi)是属于肠杆菌科中一种比较常见的革兰阴性杆菌,常通过污染的食物或水进入人体肠道,引起一种全身系统性疾病伤寒热[1].据报道,2019年全球有超过20万人死于伤寒沙门菌感染引起的综合症[2].S.Typhi进入宿主后主要在小肠远端聚集,然后借助自身的毒力因子如菌毛、鞭毛、Ⅲ型分泌系统(typeⅢsecretionsystem,T3SS)等入侵肠上皮细胞,并在宿主吞噬细胞内生存和复制[3].在此过程中,S.Typhi通过沙门菌致病岛1(Salmonellapathogenicityisland1,SPI-1)编码的T3SS传递专门的效应蛋白来入侵非吞噬性肠上皮细胞,这在沙门氏菌的发病机制中发挥了关键作用[4].鞭毛不仅是细菌的运动器官,还是沙门氏菌致病过程中一种重要的毒力因子,其对S.Typhi在肠道内的早期定植和侵袭发挥重要的介导作用,也是生物膜形成的重要因素[5].生物膜是指菌体附着在各种生物或非生物表面,形成的具有一定空间结构的细菌群落.生物膜的形...
