2022年12月第30卷第8期中国实验动物学报ACTALABORATORIUMANIMALISSCIENTIASINICADecember2022Vol.30No.8钟秋梅,张佳,李林英,等.β-glucan诱导训练免疫及其在逆转免疫耐受中的应用[J].中国实验动物学报,2022,30(8):1013-1022.ZhongQM,ZhangJ,LiLY,etal.β-glucaninducestrainedimmunityanditsapplicationinreversingimmunetolerance[J].ActaLabAnimSciSin,2022,30(8):1013-1022.Doi:10.3969/j.issn.1005-4847.2022.08.001[基金项目]国家自然科学基金项目面上项目(32070904)。FundedbytheNationalNaturalScienceFoundationofChina(32070904).[作者简介]钟秋梅(1996—),女,在读硕士研究生,研究方向:先天免疫与免疫耐受。Email:15882263246@163.com[通信作者]郑世进(1979—),男,教授,博士生导师,研究方向:先天免疫系统功能调控;先天免疫耐受;先天免疫与肿瘤治疗。Email:jamescheng@xmu.edu.cnβ-glucan诱导训练免疫及其在逆转免疫耐受中的应用钟秋梅1,2,张佳1,2,李林英1,2,郑世进1,2∗(1.厦门大学生命科学学院,福建厦门361100;2.厦门大学细胞应激生物学国家重点实验室,福建厦门361100)【摘要】目的本研究拟通过在体内和体外诱导训练免疫反应,以探讨诱导训练免疫是否可能逆转免疫耐受状态。方法以β-glucan作为训练免疫诱导剂,建立体外小鼠胫骨来源的巨噬细胞(bonemarrowderived-macrophages,BMDM)训练免疫模型:40μg/mLβ-glucan刺激BMDM24h,随后用PBS洗涤后让BMDM在完全培养基中静息6d,在第3天的时候补充培养基,第7天收集细胞100ng/mLLPS再刺激,4h后收集细胞抽提RNA和24h后收集细胞上清;建立β-glucan体内训练免疫模型:野生型C57BL/6J腹腔注射1mgβ-glucan,对照组腹腔注射200μL的PBS,7d后感染金黄色葡萄球菌(每只1×104/200μLPBS)。LPS诱导体外免疫耐受,体外免疫耐受逆转通过在耐受的BMDM中加入40μg/mLβ-glucan刺激24h,随后让细胞静息1d,通过促炎因子的恢复水平来反映耐受逆转情况。盲肠结扎穿刺(cecalligationandpuncture,CLP)诱导体内免疫耐受,体内免疫耐受逆转通过向CLP组腹腔注射1mgβ-glucan,通过再次感染非致死剂量的细菌或真菌的生存率反映耐受逆转情况。结果(1)经过β-glucan训练的BMDM,在LPS再次刺激时产生更高水平的促炎因子TNF-α、IL-6和NO。同时,β-glucan训练的BMDM通过激活m-TOR信号通路,导致细胞代谢模式向糖酵解转变,引起细胞内乳酸增多;(2)β-glucan诱导的体内训练免疫具有保护作用;(3)β-glucan在体外能够逆转LPS诱导的免疫耐...
