胃癌是全球常见的恶性肿瘤,中国胃癌发病例数占全球胃癌发病的42.6%、死亡例数占全球死亡的45%,位于全球发病率的第5位,死亡率的第6位[1]。目前,恶性肿瘤的靶向治疗被认为是未来恶性肿瘤治疗中最具前景的方向,然而靶向治疗的前提和关键是有合适的靶点[2]。因此,对胃癌细胞侵袭、转移和血管形成机制的研究可以为寻找到预防和治疗胃癌的靶点提供理论基础,对降低胃癌患者死亡率、延长患者寿命都具有十分重要的意义。高半胱氨酸蛋白61(cysteinerich61,Cyr61)是生长因子CCN家族中第一个被发现的成员。越来越多的证据表明肿瘤组织中Cyr61表现出不同程度的异常。一方面是过度表达,研究发现Cyr61在胃癌、乳腺癌、胶质瘤、结肠癌、膀胱癌、前列腺癌等多种肿瘤中呈高表达[3,4]。有趣的是在非小细胞肺癌、子宫内膜癌、黑色素瘤、前列腺癌中Cyr61呈低表达状态[5,6]。因此,本研究继续探究Cyr61对胃癌细胞生物学行为的影响及分子机制,为Cyr61能否真正成为预防和治疗胃癌的新靶点提供可靠的依据。1材料与方法1.1主要试剂细胞MGC80-3细胞系获自中科院。RPMI-1640,DMEM培养液购自Corning公司。RIPA蛋白裂解液购自碧云天公司。蛋白Marker和ECL化学发光显色试剂盒购自Thermo公司。Transwell小室购自Corning公司,MTT检测试剂盒购自上海鼎国生物技术有限公司,pEGFP-H1/Cyr61病毒购于吉凯基因公司。针对蛋白质的抗体:Cyr61兔抗体(Abcam,美国,编号ab233097,按1:1000稀释)、GAPDH小鼠抗体(Santacruz,美国,sc-32233,按1:2000稀释)。凋亡试剂盒购自eBio-science公司。DPBS,Matrigel购自Corning公司。Calcein-AM购自Thermo公司。1.2构建表达沉默Cyr61的短发夹RNA(shortCyr61的表达对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭能力影响的研究郑慧敏,李连兴(赤峰市医院,内蒙古赤峰024000)收稿日期:2022-07-10通讯作者:李连兴(1972-),赤峰市医院主任医师,547635179@qq.com基金项目:内蒙古医科大学百万工程联合基金项目(YKD2017KJBW(LH)075)摘要:目的:观察Cyr61基因表达对人胃癌细胞MGC80-3生物学行为的影响。方法:慢病毒法构建稳定敲减Cyr61的人胃癌细胞MGC80-3;qPCR和Westernblot检测敲减Cyr61的MGC80-3细胞内源性Cyf61的表达;细胞划痕实验、Transwell、四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、流式细胞仪检测、体外血管生成实验检测Cyr61对人胃癌细胞MGC80-3的生物学行为。结果:在MGC80-3细胞中,敲减Cyr61的MGC80-3人胃癌细胞的mRNA和蛋白水平均低于对照组;对照...