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‘新番72号’加工番茄定点突变的耐贮性初步探讨_张西英.pdfVIP免费

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西北农业学报2023,32(2):290-298ActaAgriculturaeBoreali-occidentalisSinicadoi:10.7606/j.issn.1004-1389.2023.02.013https://doi.org/10.7606/j.issn.1004-1389.2023.02.013‘新番72号’加工番茄定点突变的耐贮性初步探讨收稿日期:2021-05-24修回日期:2022-02-25基金项目:国家自然科学基金(31760571);新疆兵团强青科技创新人才计划(2021CB037)。第一作者:张西英,女,副研究员,研究方向为作物遗传育种。E-mail:592354963@qq.com通信作者:刘江娜,女,副研究员,研究方向为作物遗传育种。E-mail:284984737@qq.com张爱萍,女,研究员,研究方向为植物分子育种研究。E-mail:379409419@qq.com张西英,刘江娜,李荣霞,薛丽萍,白云凤,张爱萍(新疆生产建设兵团第六师农业科学研究所,新疆五家渠831300)摘要为研究建立加工番茄‘新番72号’的CRISPR-Cas9基因编辑系统。通过对番茄全基因组序列扫描,从SlACS2基因上游编码区筛选出高特异性sgRNA,利用CRISPR-Cas9系统对SlACS2基因进行定点突变使其失活,使系统Ⅰ乙烯正常表达以保证植株正常生长,又适度抑制系统Ⅱ乙烯生成,迟滞果实过熟软化,提高耐贮运性能。结果表明:在第1外显子的sgRNA中,位于外显子132~154nt的sgRNA1-14特异性最好,GC含量较高,靶向特异性综合得分也较高,可为优选sgRNA。第2外显子没有合适的sgRNA可选择。试验共完成394份植株的测序工作,从中筛选出无T-DNA的突变株6个,根据测序结果明确了不同植株的突变类型,其中357个植株发生突变,突变率为90.6%,纯合突变率为36.8%。这一技术较杂交育种周期短,较诱变育种定向性好,较常规基因工程安全性高,将为番茄的遗传改良研究建立一个高效安全的技术体系。关键词番茄;耐贮性;遗传转化;基因编辑新疆是中国主要的加工番茄种植基地,其机械采收已达到70%以上。由于番茄果实易过熟软化,致使耐压性能变差、抗病原菌能力降低,已严重影响到生产、贮运及加工品质[1]。培育抗软化、耐贮运的番茄新品种对新疆加工番茄的...

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