仔猪副伤寒活疫苗（C500株）生产操作细则本品系使用免疫原性良好的猪霍乱沙门氏菌弱毒株，接种适宜培养基培养，收获培养物加入适当稳定剂，经真空冷冻干燥制成。本品用于预防仔猪副伤寒活疫苗。1、菌种1.1疫苗生产用菌种为猪霍乱沙门氏菌C500弱毒株，原种购于中国兽药检查所，经扩繁后由质检部鉴定、保管、供应。1.2菌种标准1.2.1C500弱毒株应符合以下标准1.2.1.1形态和生化特性本菌为革兰氏阴性小杆菌，生化特性应符合细菌分类学中本菌的特性。1.2.1.2培养特性在普通琼脂平板上，37℃培养18-22小时，菌落为圆形、边缘整齐、突起、半透明、略湿润的光滑型。1.2.1.3血清学特性普通琼脂新鲜培养物用玻片凝集检查法，对沙门氏菌属O7因子血清出现凝集反应。1.2.1.4特异性在含1%的醋酸铊的普通肉汤中呈均匀浑浊生长，用新鲜普通琼脂培养物与1\500%吖啶黄溶液做玻片凝集试验应不出现凝集反应。1.2.1.5安全性用pH7.4-7.6的普通肉汤或蛋白胨水，将培养24-48小时的普通琼脂斜面培养物洗下并作活菌计数，注射下列动物应符合标准。小白鼠18-22g（30-35日龄）的小白鼠10只，各皮下注射0.2ml，含活菌数1亿，观察21日，至少应存活9只。家兔体重1.5-2.0kg的家兔5只，各皮下注射1ml，含活菌数100亿，观察21日应存活。仔猪用体重15kg以上的健康易感断奶仔猪4头，各静脉注射1ml，含活菌数30亿，观察1个月应存活。1.3冻干菌种2-8℃保存期为10年。2、疫苗制造及半成品检验2.1生产用菌种的制备2.1.1一级种子繁殖和鉴定冻干种子用普通肉汤稀释或经普通肉汤后，接种普通琼脂平板，37℃培养18-20小时，观察菌落形态，菌落为圆形、边缘整齐、突起、半透明、略湿润的光滑型。选取中等偏大的菌落5-10个，混合后接种于普通琼脂斜面若干只，37℃培养24小时，经纯粹检验合格，并用0.2%吖啶黄溶液做玻片凝集试验应合格，作为一级种子。在2-8℃保存期不超过1个月，在此期间可以移植1-2次，在培养基上继代不超过5代。2.1.2二级种子繁殖取一级种子接种于普通琼脂或普通肉汤，37℃培养24小时，经纯粹检验合格后，即可作为生产种子，在2-8℃保存期不超过2日。2.2制苗用培养基制备2.2.1材料牛肉要求应采购新鲜的精牛肉，3-5岁，前后腿、胸部，尽量少含脂肪、肌腱、筋膜等。鱼蛋白胨1.5%胰蛋白胨0.5%氯化钠0.5%氢氧化钠水2.2.2制备方法将新鲜的精牛肉去掉脂肪、筋膜等绞碎，纯化水低温浸泡24小时，100℃煮沸2小时，补足失去的...
