小鼠颈部异位心脏移植模型制作目前多采用大鼠心脏移植模型,其缺点在于:1.大鼠的遗传背景资料没有小鼠完善;2.目前的转基因及基因敲除动物多为小鼠;3.针对小鼠的诊断试剂种类要比大鼠丰富得多。鉴于此,建立了小鼠的心脏移植模型是目前研究移植免疫最主要的模型。一、实验动物:供、受者均选用雄性近交系小鼠如Balb/c(H-2d),10~12周龄,体重25-30g。二、实验器材:36倍手术显微镜(WildM691),10/0血管缝线(Ethicon公司或上海医用缝合针厂),一次性电凝器(JohnWeiss&SonLtd.公司),三、麻醉剂:Hypnorm与Hypnovel(Janssen公司)。麻醉剂Hypnorm与Hypnovel均用蒸馏水按1:4稀释,等体积混合后,小鼠腹腔注射0.15~0.2ml/只。四、供心切取术小鼠四肢固定,剃毛,75﹪酒精消毒,正中开腹,暴露下腔静脉,注射20u/ml肝素生理盐水1ml,横断下腔静脉及主动脉放血,横断膈肌,从双侧锁骨中线由下至上直至锁骨剪开,离断前胸壁,0~4℃生理盐水停搏心脏,去除周围脂肪组织及胸腺,10倍手术显微镜视野下用6-0丝线近心房处分离结扎右上腔静脉并右心房及下腔静脉,远端剪断;游离升主动脉及主动脉弓,在无名动脉分支处远心端结扎主动脉,远端横断。在无名动脉分支处远心端横断。游离肺动脉主干并在分支处剪断,左上腔静脉、左心房与肺静脉用6-0丝线结扎,远端游离。全心修剪后保存于0~4℃生理盐水中。五、受者手术(一)移植部位的准备小鼠四肢用纸胶布固定于手术板上,置一橡皮筋于上下切齿之间以固定头部,头朝术者,剃毛,消毒。自下颌中点至右锁骨中点处剪一长约1cm斜切口,游离皮下组织,灼断颌下腺体及部分脂肪组织,仔细游离右侧颈外静脉,在远心端分支处用丝线结扎,其间小分支用电凝器灼断,微血管夹近心端阻断静脉,并在远心端横断之;灼断右侧胸锁乳突肌,暴露颈动脉鞘,充分游离颈动脉,远心端结扎,微血管夹阻断近心端,横断颈动脉。(二)供心植入术用一小片吸水纸包裹供心置于受者右颈部,冰盐水降温,注意调整好供心位置以利吻合。在36倍手术视野下,供心无名动脉与受者颈总动脉作间用10-0Ethicon血管缝线作端-端吻合,具体为先在3点(时钟定位法,下同)处吻合一针,然后在对侧9点处吻合第二针,前壁11点及1点处各吻合一针,顺时针翻转微血管夹及供心180°,暴露后壁,在后壁7点及5点处各吻合一针,然后还原至原来位置,共6针。注意尽可能使边距及针距均匀对称。接着用10-0国产血管缝线做供心肺动脉与受者颈外静脉连续端-端吻合,具体...