ABO血型鉴定---玻片法资料.ppt

目录目录 一一.实验目的实验目的 二二.实验原理及相关知识实验原理及相关知识 三三.实验材料实验材料 四四.实验步骤实验步骤 五五.注意事项注意事项 六六.实验结果实验结果 七七.实验小结实验小结 一一.实验目的实验目的 (1)学习辨别学习辨别ABO血型的方法血型的方法 (2)掌握掌握ABO血型鉴定的原理血型鉴定的原理 (3)认识血型鉴定在输血中的重要性认识血型鉴定在输血中的重要性 在在ABOABO血型系统中，红细胞膜有血型系统中，红细胞膜有A A和和（或）（或）B B两种凝集原，而血清中有抗两种凝集原，而血清中有抗A A和抗和抗B B两种抗体。两种抗体。A A凝集原加抗凝集原加抗A A抗体或抗体或B B凝集原加抗凝集原加抗B B抗体会出现红细胞抗体会出现红细胞凝集凝集现象现象，从而测知受试者红细胞膜上有，从而测知受试者红细胞膜上有无无A A或或/和和B B凝集原以判断血型。凝集原以判断血型。二二.实验原理实验原理 含某种凝含某种凝集原的红集原的红细胞细胞+含相应凝含相应凝集素的血集素的血清清 红细胞凝集反应红细胞凝集反应(agglutination)1.1.实验原理实验原理 血型不相容的两人血液血型不相容的两人血液 混合混合,则红细胞可凝集成簇则红细胞可凝集成簇 三三.实验材料实验材料 一次性采血针一次性采血针 玻片玻片 消毒牙签消毒牙签 试管及吸管试管及吸管 标准抗标准抗A和抗和抗B血清血清 毛细吸管毛细吸管及胶头及胶头 75%乙醇乙醇 消毒棉签消毒棉签 记号笔记号笔 材料筐材料筐 2、5%的受检者红细胞悬液配制：的受检者红细胞悬液配制：于小试管中加入于小试管中加入NS 5滴，用滴，用75酒精消毒指尖或耳垂，用酒精消毒指尖或耳垂，用一次性采血针迅速刺破消毒部一次性采血针迅速刺破消毒部位的皮肤，毛细吸管取血加入位的皮肤，毛细吸管取血加入小试管中，混匀，即得约小试管中，混匀，即得约5红细胞悬液。红细胞悬液。四四.实验步骤实验步骤 1、生理盐水配制：称取、生理盐水配制：称取0.9gNaCl加入少量加入少量ddH2O使之完全溶解，再用使之完全溶解，再用ddH2O定容至定容至100ml即可。即可。3.3.取清洁玻片一块，两端分别标明“抗取清洁玻片一块，两端分别标明“抗A”A”和“抗和“抗B”B”。4.4.在相应玻片上的中央处分别滴加标准抗在相应玻片上的中央处分别滴加标准抗A A 和抗和抗B B血清各一滴。血清各一滴。5.5.用滴管吸取红细胞悬液，分别各滴一滴用滴管吸取红细胞悬液，分别各滴一滴 于玻片两端的血清上，注意勿使滴管与血于玻片两端的血清上，注意勿使滴管与血 清相接触。清相接触。6.6.竹签两头分别混合，搅匀。竹签两头分别混合，搅匀。7.7.观察结果。如有凝集反应可见到呈观察结果。如有凝集反应可见到呈红色红色点状或小片状凝集块为阳性点状或小片状凝集块为阳性。先用肉眼看。先用肉眼看有无凝集现象，肉眼不易分辨时，则在低有无凝集现象，肉眼不易分辨时，则在低倍显微镜下观察，如有凝集反应，可见红倍显微镜下观察，如有凝集反应，可见红细胞聚集成团。细胞聚集成团。8.8.判断血型判断血型 根据被试者红细胞是否被根据被试者红细胞是否被A A，B B型标准血清所凝集，判断血型。型标准血清所凝集，判断血型。五五.实验结果判断实验结果判断 抗抗A型标准血清型标准血清 抗抗B型标准血清型标准血清 B型型 抗抗A型标准血清型标准血清 抗抗B型标准血清型标准血清 A型型 抗抗A型标准血清型标准血清 抗抗B型标准血清型标准血清 抗抗A型标准血清型标准血清 抗抗B型标准血清型标准血清 O型型 AB型型 示示 意意 图图 六、实验结果 记录本实验的结果记录本实验的结果 七、临床应用 1、玻片、试管都要、玻片、试管都要标记标记！2、A及及B标准血清绝对不能相混标准血清绝对不能相混,不要依靠用染料颜色不要依靠用染料颜色标记血清。标记血清。3、所用玻片、试管实验前必须清洗干净，以免出现假、所用玻片、试管实验前必须清洗干净，以免出现假凝集现象。凝集现象。4、红细胞悬液滴管头不能接触标准血清液面，牙签一红细胞悬液滴管头不能接触标准血清液面，牙签一端混匀一侧就不能去接触另一侧。端混匀一侧就不能去接触另一侧。5、一般先加血清，然后再加红细胞悬液一般先加血清，然后再加红细胞悬液，便于核实是，便于核实是否漏加血清。试验用血清和试剂红细胞都应标准化。否漏加血清。试验用血清和试剂红细胞都应标准化。6、要在、要在光亮的背景光亮的背景下观察凝集下观察凝集,可使用光镜检查小的凝可使用光镜检查小的凝集集,同时应注意观察凝集强度，有助于同时应注意观察凝集强度，有助于A、B亚型的发现，亚型的发现，观察后立即记录观察结果。观察后立即记录观察结果。八注意事项八注意事项