第四节动物及植物细胞制药动植物细胞培养是指动、植物细胞在体外条件下的存活或生长。一、动物细胞的培养一、动物细胞的培养动物细胞产物及医学应用产物医学应用疫苗人小儿麻痹症,狂犬,风疹,乙肝表面抗原,疱疹或某些癌症动物牛病毒性腹泻,口蹄疫,犬瘟病,猪霍乱,马脑炎等单克隆抗体IgG,IgM,IgA等免疫调节剂干扰素,白细胞活化因子,β-细胞生长因子,白细胞介素-2,血清胸腺因子,巨噬细胞毒力因子酶脲激酶,胶原酶,细胞色素P450,纤维蛋白溶酶原激活剂,胃蛋白酶,胰蛋白酶,酪氨酸脱羧酶激素绒膜促性腺激素,促红细胞生成素,生长激素,促黄体激素1、动物细胞的形态1)1)成纤维细胞型成纤维细胞型2)2)上皮细胞型上皮细胞型3)3)游走细胞型游走细胞型4)4)多行性细胞型多行性细胞型5)5)悬浮型细胞悬浮型细胞22、培养基的常用成分、培养基的常用成分1)氨基酸2)维生素3)盐4)葡萄糖5)有机添加剂6)血清3、培养基制备应考虑的因素1)1)pHpH值值多数细胞系在pH7.4下生长很好。但上皮细胞以pH5.5合适。酚红常用作指示剂。2)2)缓冲能力缓冲能力3)3)渗透压渗透压4)4)黏度黏度4、细胞培养的环境要求((11)支持物)支持物体外培养的大多数动物细胞需在人工支持物上单层生长。1)1)玻璃玻璃2)2)塑料制品塑料制品3)3)微载体微载体大规模动物细胞贴壁培养最常用的支持物是微载体,其材料有聚苯乙烯、交联葡萄糖、聚丙稀酰胺、纤维素衍生物、几丁质、明胶等。通常用特殊的技术制成100~200μm直径的圆形颗粒,大多都是一次性的。支持物通过各种处理后,可改善细胞的贴壁和生长性能。((22)气体交换)气体交换①①氧气氧气各种培养对氧的要求不同,大多数动物细胞培养适合于大气中的氧含量或更低些。②②二氧化碳二氧化碳(3)培养温度温度是细胞再体外生存的基本条件之一,来源不同的动物细胞,其最适生长温度是不相同的。温血动物细胞温度为36.5℃,可略低一点;鸟类细胞在38.5℃时生长最佳。动物细胞对低温的耐受力比高温强。培养细胞在4℃下能生存数天,并能在-196℃下冷冻贮藏,但超过正常温度2℃,只能耐受数小时,40℃以上细胞很快死亡。变温动物细胞有较大的温度范围,但应保持在一个恒定值,且在所属动物的正常温度范围内。温度调节的范围最大不超过0.5℃。5、动物细胞培养的方法动物细胞无论是贴壁培养还是悬浮培养,均可分为分批式、流加式、半连续式、动物细胞无论是贴壁培养还是悬浮培养,均可分为分批式、流加...