单位及实验室名称项目汉源县人民医院检验科化脓及创伤感染标本的细菌学检验编号：LAB/SOP/HY/微-002日期：2010年5月3日版本：第一版，第0次修订第1页，共3页一、【标本采集】1.开放性脓肿和脓液分泌物：先以无菌盐水冲洗溃疡面，用无菌棉拭子采取脓液及病灶深部的分泌物，而瘘管则以无菌方法采取组织碎片放入无菌试管中送检。2.大面积烧伤的创面分泌物：用无菌棉拭子取多部位创面的脓液或分泌物，置灭菌试管内送检。可将蘸有脓液的最内层敷料放入无菌平皿内送检。3.封闭性脓肿：先用无菌生理盐水拭净病灶表面的污染杂菌。然后以无菌注射器抽取脓汁及分泌物；也可于切开排脓时，以无菌棉拭子采取。4.做厌氧菌培养时，一定以无菌注射器抽取脓汁分泌物，厌氧状态下送检。二、【检验方法】1.直接涂片检查（1）一般细菌涂片检查：取脓汁或分泌物直接涂片、染色、镜检，可初步报告：找到革兰氏ⅹ菌，形似ⅹ菌。如发现具有芽孢或荚膜的细菌，报告时应注明其大小与位置，以及疑是ⅹ菌。如镜检时未发现细菌，可初步报告为“直接涂片，未找到细菌”。（2）对疑有结核杆菌感染的标本，还应做抗酸染色。2.细菌培养（1）一般细菌培养：取脓汁棉拭子或脓汁接种于血平板上，中国兰、巧克力平板划线分离，分别置需氧或CO2环境35℃孵育培养18-24h，观察结果。如有细菌生长，分别涂片行革兰氏染色镜检。并作生化反应或血清学鉴定，即可报告：“培养出ⅹ菌”，如观察48h后无菌生长，则报告“培养48h后，无细菌生长。”（2）厌氧菌培养：可将标本接种于牛心、牛脑浸出液或布氏杆菌肉汤培养基中，置厌氧环境下培养。（3）结核杆菌培养：一般将脓汁约0.1ml直接接种到结核杆菌培养基3-4w培养。三、【检验程序】脓汁、创伤分泌物↓—————————————————————————————↓↓↓涂片、革兰染色及抗酸染色镜检需氧培养厌氧培养↓↓↓初步报告血平板（巧克力平板）及伊红美兰或麦康凯平板厌氧血平板及1硫乙醇酸钠培养基或疱肉增菌培养基∣↓←——————————观察菌落↓↓———————————————————————————↓涂片、染色镜检纯培养↓生化反应及血清学鉴定↓药物敏感性试验↓报告结果作者：肖德慧时间：2010-5-32
