影响抗B杂交瘤细胞抗体分泌的因素研究来源:青年人(Qnr.Cn)更新时间:2010/3/1117:23:53【字体:小大】摘要通过试管法和玻片法检测抗B抗体的效价和亲和力研究了影响抗B杂交瘤细胞抗体分泌的部分因素,结果显示:0.25mmol/L,0.5mmol/L丁酸钠和部分浓度rhIL-6能明显提高抗B抗体的效价和亲和力;胰岛素和维甲酸不能提高抗体的效价和亲和力。HAT培养基重筛选可使部分小体积细胞迅速死亡,抗B抗体的效价和亲和力明显提高,提示丁酸钠,rhIL-6和HAT重筛选可提高抗B杂交瘤细胞抗体的分泌。关键词单克隆抗体;血型定型试剂;杂交瘤细胞中图分类号:Q813.2文献标识码:A文章编号:1005-8915(2000)03-0146-03TheInfluentialElementsonSecretionofAnti-BAntibodyfromHybridmaYaoYuyou,ZhangLingling,WangXiaoqin(HefeiSoutheastMedicalScienceandTechologyDevelopmentCoLtd,AnhuiMedicalUniversity,Hefei230032)AbstractSomeinfluentedelementsofanti-Bantibodysecretedfromhybridomawasstudiedbytestingthetiterandaffinity.Theresultsshowedthat0.25mmol/Land0.5mmol/LsodiumbutyrateandvariousconcentrationsofrhIL-6couldsignificantlyincreasethetiterandaffinityofanti-B.Butitcouldnotbepromotedbyinsulinandretinoicacid.SomesmalleronesoftheexperimentalcellsdiedrapidlyintheHATmedium,afterwhichthetiterandaffinityofanti-Brosemarkedly.ItisconcludedthesodiumbutyrateandrhIL-6couldpromotethetiterandaffinityofanti-Bsecretedbyhybridoma,survivingclonesinHATmediumcouldsecretemoreanti-Bantibody.KeyWordsMonoclonalantibody,Bloodgroupingreagents,Hybridoma血型定型单克隆抗体试剂已广泛用于临床医学,法医学,考古学等工作中,与某些发达国家相比,我国血型定型试剂在效价和亲和力方面仍存在一定差距,有些企业因产品效价和亲和力达不到国家标准而致产量大幅度下降,故研究出提高抗体效价和亲和力的方法将有着深远的意义。目前国际上少数学者正致力于研究无血清培养基中杂交瘤细胞抗体分泌的影响因素[1],但有关在含血清培养基中如何提高杂交瘤细胞抗体分泌报导甚少,为此我们开展了本实验。1材料1.1细胞系抗B-6-1-G11由本校分子生物学研究室提供。1.2试剂牛胰岛素(40U/ml),上海生物化学试剂厂生产;RPMI1640,美国GIBCO产品;氨甲喋呤(Amiopterin,A,AR级)Fluka公司产品;丁酸钠(AR级),次黄嘌呤(Hypoxanthine,H,AR级)...